Методика замфир в модификации реана: 17.2. Мотивация профессиональной деятельности (методика к. Замфир в модификации а. Реана)

Содержание

17.2. Мотивация профессиональной деятельности (методика к. Замфир в модификации а. Реана)

Методика может применяться для диагностики мотивации профессиональной деятельности, в том числе мотивации профессионально-пе­дагогической деятельности. В основу положена концепция внутренней и внеш­ней мотивации.

Напомним, что о внутреннем типе мотивации следует говорить, когда для личности имеет значение деятельность сама по себе. Если же в основе мотива­ции профессиональной деятельности лежит стремление к удовлетворению иных потребностей, внешних по отношению к содержанию самой деятельности (мотивы социального престижа, зарплаты и т.д.), то в данном случае принято говорить о внешней мотивации. Сами внешние мотивы делятся здесь на вне­шние положительные и внешние отрицательные. Внешние положительные мо­тивы, несомненно, более эффективны и более желательны со всех точек зрения, чем внешние отрицательные мотивы.

Инструкция. «Прочитайте нижеперечисленные мотивы профессиональной деятельности и дайте оценку их значимости для вас по пятибалльной шкале (табл. 17.5)».

Обработка результатов. Подсчитываются показатели внутренней (ВМ), внешней положительной (ВПМ) и внешней отрицательной (ВОМ) мотивации в соответствии со следующими ключами.

Показателем выраженности каждого типа мотивации будет число, заключен­ное в пределах от 1 до 5 (в том числе возможно и дробное).

Интерпретация результатов. На основании полученных результатов опре­деляется мотивационный комплекс личности. Мотивационный комплекс пред­ставляет собой тип соотношения между собой трех видов мотивации: ВМ, ВПМ и ВОМ.

К наилучшим, оптимальным, мотивационным комплексам следует относить следующие два типа сочетаний:

ВМ > ВПМ > ВОМ и ВМ = ВПМ > ВОМ.

Таблица 17.5

Шкала мотивов профессиональной деятельности

Мотивы профессиональной деятельности

1

2

3

4

5

1. Денежный заработок

2. Стремление к продвижению по работе

3. Стремление избежать критики со стороны руководителя или коллег

4. Стремление избежать возможных наказаний или неприятностей

5. Потребность в достижении социального престижа и уважения со стороны других

6. Удовлетворение от самого процес­са и результата работы

7. Возможность наиболее полной самореализации именно в данной деятельности

Наихудшим мотивационным комплексом является тип

ВОМ > ВПМ > ВМ.

Между этими комплексами заключены промежуточные с точки зрения их эффективности иные мотивационные комплексы.

При интерпретации следует учитывать не только тип мотивационного комп­лекса, но и то, насколько сильно один тип мотивации превосходит другой по сте­пени выраженности.

Например, нельзя два мотивационных комплекса (табл. 17.6) считать абсо­лютно одинаковыми.

И первый, и второй мотивационный комплекс относятся к одному и тому же неоптимальному типу

ВОМ > ВПМ > ВМ.

Однако видно, что в первом случае мотивационный комплекс личности зна­чительно негативнее, чем во втором. Во втором случае по сравнению с первым имеет место снижение показателя отрицательной мотивации и повышение пока­зателей внешней положительной и внутренней мотивации.

Таблица 17.6

mpdz — Психологическая диагностика

 
 
                                 МЕТОДИКА:                                  
                  Мотивация профессиональной деятельности                   
                               (К. Замфир)                                  
                         (модификация А. А. Реана).                         
  
      Методика может применяться для диагностики мотивации профессиональной 
 деятельности. В основу положена концепция о внутренней и  внешней  мотива- 
 ции.                                                                       
      О внутренней мотивации следует говорить,  когда  для  личности  имеет 
 значение деятельность сама по себе. Если же в основе мотивации  профессио- 
 нальной деятельности лежит стремление к удовлетворению иных  потребностей, 
 внешних по отношению к содержанию самой деятельности  (мотивы  социального 
 престижа, зарплаты и т.
 д.), то в данном случае принято говорить о внешней   мотивации.                                                                        Сами внешние мотивы дифференцируются на внешние положительные и внеш-   ние отрицательные. Внешние положительные мотивы, несомненно, более  эффек-   тивны и более желательны со всех точек зрения, чем  внешние  отрицательные   мотивы.                                                                             Обработка результатов.                                                       После заполнения листа ответов подсчитываются  показатели  внутренней   мотивации (ВМ), внешней положительной (ВПМ) и                                внешней отрицательной  мотивации (ВОМ) в соответствии со следующими ключами:        ВМ  = (6 + 7)/2.                                                             ВПМ = (1 + 2 +5)/3.                                                          ВОМ = (3 + 4)/2.                                                             Показателем выраженности каждого типа мотивации будет  число,  заклю-   ченное в пределах от 1 до 5 (в том числе возможно и дробное).
                       Интерпретация данных.                                                        На основании полученных результатов определяется мотивационный  комп-   лекс личности - соотношение между собой трех видов мотивации:  ВМ,  ВПМ  и   ВОМ.                                                                                К наилучшим, оптимальным, мотивационным комплексам следует относить     следующие два типа сочетаний:                                                     ВМ > ВПМ > ВОМ.                                                              ВМ = ВПМ > ВОМ.                                                                Наихудшим мотивационным комплексом является тип ВОМ > ВПМ > ВМ.                Любые другие сочетания являются промежуточными с точки зрения их  эф-   фективности.                                                                        При интерпретации следует учитывать не только мотивационное соотноше-   ние, но и показатели отдельных видов мотивации.
                                   Например, нельзя два нижеприведенных мотивационных комплекса  считать   абсолютно одинаковыми:                                                            ВМ  ВПМ ВОМ                                                                  1    2   5                                                                   2    3   4                                                                   Оба они относятся к одному и тому же неоптимальному типу:                    ВОМ > ВПМ > ВМ.                                                              Однако видно, что в первом  случае  мотивационный  комплекс  личности   значительно негативнее, чем во втором. Во втором  случае  по  сравнению  с   первым имеет место снижение показателя внешней отрицательной  мотивации  и   повышение показателей внешней положительной и внутренней мотивации.                 Примечания к компьютерной версии.                                            В данной программе автоматическая интерпретация тестовых  показателей    основана на следующих условных критериях:                                        1 -  низкий показатель;                                                      2 -  пониженный показатель;                                                  3 -  средний показатель;                                                     4 -  повышенный показатель;                                                  5 -  высокий показатель.
                                                       Опросник состоит из 7 вопросов.                                              Примерное время тестирования 3-5 минут.                                                               ПРИМЕР ТЕСТИРОВАНИЯ:                                                                   ---                                                                ПСИХОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА.                            Методика: Мотивация профессиональной деятельности.                           Ф.И.О:____________________                                                   Доп. данные:______________                                                                                   Диаграмма:                                            ВМ  ╟─▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▓▓▓▓▓▓▓▓▓▓████████████████████─╢>                    ВПМ ╟─▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▓▓▓▓▓▓▓▓▓▓─────────────────────╢>                    ВОМ ╟─▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▓▓▓▓▓▓▓▓▓▓██████████───────────╢>                          <──[--]──><──[-]───><──[=]───><──[+]───><──[++]──>                                               Tестовые показатели:                                             1.
 Внутренняя мотивация             -  ВМ  =  5.00                           2. Внешняя положительная мотивация  -  ВПМ =  3.00                           3. Внешняя отрицательная мотивация  -  ВОМ =  4.00                                                ИНТЕРПРЕТАЦИЯ:                                            Высокий уровень внутренней мотивации. Для личности имеет зна-           чение удовлетворение от самого процесса и результата работы и воз-           можность наиболее полной самореализации именно в  данной  деятель-           ности.                                                                              Средний уровень внешней положительной мотивации  связанной  с           потребностью в достижении социального престижа и уважения со  сто-           роны других, стремлением к продвижению по службе,  денежным  зара-           ботком.                                                                             Повышенный уровень внешней отрицательной мотивации,  отражаю-           щей стремление избежать критики со стороны руководителя  или  кол-           лег, а также возможных наказаний или неприятностей.                           

17.2.  Мотивация профессиональной деятельности (методика К. Замфир в модификации А. Реана)

Методика может применяться для диагностики мотивации профессиональной деятельности, в том числе мотивации профессионально-пе­дагогической деятельности. В основу положена концепция внутренней и внеш­ней мотивации.

Напомним, что о внутреннем типе мотивации следует говорить, когда для личности имеет значение деятельность сама по себе. Если же в основе мотива­ции профессиональной деятельности лежит стремление к удовлетворению иных потребностей, внешних по отношению к содержанию самой деятельности (мотивы социального престижа, зарплаты и т.д.), то в данном случае принято говорить о внешней мотивации. Сами внешние мотивы делятся здесь на вне­шние положительные и внешние отрицательные. Внешние положительные мо­тивы, несомненно, более эффективны и более желательны со всех точек зрения, чем внешние отрицательные мотивы.

Инструкция. «Прочитайте нижеперечисленные мотивы профессиональной деятельности и дайте оценку их значимости для вас по пятибалльной шкале (табл. 17.5)».

Обработка результатов. Подсчитываются показатели внутренней (ВМ), внешней положительной (ВПМ) и внешней отрицательной (ВОМ) мотивации в соответствии со следующими ключами.

Показателем выраженности каждого типа мотивации будет число, заключен­ное в пределах от 1 до 5 (в том числе возможно и дробное).

Интерпретация результатов. На основании полученных результатов опре­деляется мотивационный комплекс личности. Мотивационный комплекс пред­ставляет собой тип соотношения между собой трех видов мотивации: ВМ, ВПМ и ВОМ.

К наилучшим, оптимальным, мотивационным комплексам следует относить следующие два типа сочетаний:

ВМ ВПМ ВОМ  и  ВМ = ВПМ ВОМ.

Таблица 17.5

Шкала мотивов профессиональной деятельности

Мотивы профессиональной деятельности

1

2

3

4

5

1. Денежный заработок

2. Стремление к продвижению по работе

3. Стремление избежать критики со стороны руководителя или коллег

4. Стремление избежать возможных наказаний или неприятностей

5. Потребность в достижении социального престижа и уважения со стороны других

6. Удовлетворение от самого процес­са и результата работы

7. Возможность наиболее полной самореализации именно в данной деятельности

Наихудшим мотивационным комплексом является тип

ВОМ ВПМ ВМ.

Между этими комплексами заключены промежуточные с точки зрения их эффективности иные мотивационные комплексы.

При интерпретации следует учитывать не только тип мотивационного комп­лекса, но и то, насколько сильно один тип мотивации превосходит другой по сте­пени выраженности.

Например, нельзя два мотивационных комплекса (табл. 17.6) считать абсо­лютно одинаковыми.

И первый, и второй мотивационный комплекс относятся к одному и тому же неоптимальному типу

ВОМ ВПМ ВМ.

Однако видно, что в первом случае мотивационный комплекс личности зна­чительно негативнее, чем во втором. Во втором случае по сравнению с первым имеет место снижение показателя отрицательной мотивации и повышение пока­зателей внешней положительной и внутренней мотивации.

Таблица 17.6

Мотивационные комплексы (пример)

Мотивы профессиональной

деятельности

(№ п/п)

ВМ

ВПМ

ВОМ

1

1

2

5

2

2

3

4

По нашим данным (Реан А.А., 1990, 1999), удовлетворенность профессией имеет значимую соотнесенность с оптимальностью мотивационного  комплекса  педагога  (положительная   значимая   связь,     r= +0,409). Иначе говоря, удовлетво­ренность педагога избранной профессией тем выше, чем оптимальнее у него мотивационный комплекс: высокий вес внутренней и внешней положительной мо­тивации и низкий — внешней отрицательной.

Кроме того, нами установлена и отрицательная соотносительная зависи­мость между оптимальностью мотивационного комплекса и уровнем эмоцио­нальной   нестабильности   личности   педагога   (связь    значимая,    r = -0,585).

Чем оптимальнее мотивационный комплекс, чем более активность педагога мотивирована самим содержанием педагогической деятельности, стремлением достичь в ней определенных позитивных результатов, тем ниже эмоциональная нестабильность. И наоборот, чем более деятельность педагога обусловлена мо­тивами избегания, порицания, желанием «не попасть впросак» (которые начи­нают превалировать над мотивами, связанными с ценностью самой педагогиче­ской деятельности, а также над внешней положительной мотивацией), тем выше уровень эмоциональной нестабильности.

Оглавление

Понравилась статья? Поделись ею с друзьями и поддержи автора!

  • Facebook
  • Twitter
  • Мой мир
  • Google+
  • LiveJournal
  • Вконтакте

Хочешь узнавать больше? Получай новые статьи в час публикации

Мотивация профессиональной деятельности ( методика К .

Замфир в модификации А . Реана ) — FINDOUT.SU

Методика может применяться для диагностики мотивации профессиональной деятельности, в том числе мотивации профессионально-педагогической деятельности. В основу положена концепция о внутренней и внешней мотивации (см. п. З.1.). О внутреннем типе мотивации следует говорить, когда для личности имеет значение деятельность сама по себе. Если же в основе мотивации профессиональной деятельности лежит стремление к удовлетворению иных потребностей, внешних по отношению к содержанию самой деятельности (мотивы социального престижа, зарплаты и т. д.), то в данном случае принято говорить о внешней мотивации. Сами внешние мотивы дифференцируются здесь на внешние положительные и внешние отрицательные. Внешние положительные мотивы, несомненно, со всех точек зрения более эффективны и более желательны, чем внешние отрицательные мотивы.

Измерение мотивации

Инструкция

Прочитайте перечисленные ниже мотивы профессиональной деятельности и дайте оценку их значимости для Вас по пятибалльной шкале.

 

1 2 3 4 5
В очень незначительной мере В достаточно незначительной мере В не большой, но и в не маленькой мере В достаточно большой мере В очень большой мере

1. Денежный заработок _____________________________________________________

2. Стремление к продвижению по работе ______________________________________

3. Стремление избежать критики со стороны руководителя или коллег _____________

4. Стремление избежать возможных наказаний или неприятностей ________________

5. Потребность в достижении социального престижа и уважения со стороны других __________________________________________________________________________

6. Удовлетворение от самого процесса и результата работы _______________________

7. Возможность наиболее полной самореализации именно в данной деятельности _________________________________________________________________________

 

Обработка

 

Подсчитываются показатели внутренней мотивации (ВМ), внешней положительной (BПM) и внешней отрицательной (ВОМ) в соответствии со следующими ключами:

 

 

 

 

Показателем выраженности каждого типа мотивации будет число, заключенное в пределах от 1 до 5 ( в том числе, возможно, и дробное).

Интерпретация

 

На основании полученных результатов определяется мотивационный комплекс личности. Мотивационный комплекс представляет собой тип соотношения между собой трех видов мотивации: ВМ, ВПМ и ВОМ.

К наилучшим, оптимальным, мотивационным комплексам следует относить следующие два типа сочетаний:

ВМ>ВПМ>ВОМ        и      ВМ = ВПМ>ВОМ.

Наихудшим мотивационным комплексом является тип

ВОМ>ВПМ>ВМ

Между этими комплексами заключены промежуточные с точки зрения их эффективности иные мотивационные комплексы.

При интерпретации следует учитывать не только тип мотивационного комплекса, но и то, насколько сильно один тип мотивации превосходит другой по степени выраженности.

Например, нельзя два нижеприведенных мотивационных комплекса считать абсолютно одинаковыми.

  ВМ ВПМ ВОМ
1. 1 2 5
2. 2 3 4

И первый и второй мотивационный комплекс относятся к одному и тому же неоптимальному типу

ВОМ > ВПМ > ВМ

Однако видно, что в первом случае мотивационный комплекс личности значительно негативнее, чем во втором. Во вто-

ром случае по сравнению с первым имеет место снижение показателя отрицательной мотивации и повышение показателей внешней положительной и внутренней мотивации.

По нашим данным, удовлетворенность профессией имеет значимые корреляционные связи с оптимальностью мотивационного комплекса педагога (положительная значимая связь, r = +0,409). Иначе говоря, удовлетворенность педагога избранной профессией тем выше, чем оптимальнее у него мотивационный комплекс: высокий вес внутренней и внешней положительной мотивации и низкий — внешней отрицательной.

Кроме того, нами установлена и отрицательная корреляционная зависимость между оптимальностью мотивационного комплекса и уровнем эмоциональной нестабильности личности педагога (связь значимая, r = -0,585).

Чем оптимальнее мотивационный комплекс, чем более активность педагога мотивирована самим содержанием педагогической деятельности, стремлением достичь в ней определенных позитивных результатов, тем ниже эмоциональная нестабильность. И наоборот, чем более деятельность педагога обусловлена мотивами избегания, порицания, желанием «не попасть впросак» (которые начинают превалировать над мотивами, связанными с ценностью самой педагогической деятельности, а также над внешней положительной мотивацией), тем выше уровень эмоциональной нестабильности.

Литература к главе 1

1. CattellR. В ., Abilities: Their Structure, Growth and Action, Boston: Houghton Mifflin Co., 1971.

2. Абульханова-Славская К. А. Личностные тины мышления личности // Когнитивная психология. М.: Наука, 1986. С. 154-172.

3. Абульханова-Славская К. А. Социальное мышление личности: проблемы и стратегия исследования // Психологический журнал. 1994. Т. 15. № 4. С. 39-55.

4. Абульханова-Славская К. А. Стратегия жизни. М.: Мысль, 1991.

5. Аладжалова Н. А. Психофизиологические аспекты сверхмедленной ритмической активности головного мозга. М.: Наука, 1979.

6. Аминев Г. А., Кудашев А. Р. Соотношение скоростных параметров процесса решения задач и биоэлектрических индикаторов лабильности // Психологический журнал. 1989. Т. 10. № 4. С. 150-155.

7. Ананьев Б. Г. Избранные психологические труды: В 2 т. М.: Педагогика, 1980.

8. Анастази А. Психологическое тестирование: В 2 т. М.: Педагогика, 1982.

9. Анцыферова Л. И. Личность в трудных жизненных условиях: переосмысливание, преобразование ситуаций и психологическая защита // Психологический журнал. 1994. Т. 15. № 1. С. 3-18.

10. Анцыферова Л. И. Способность личности к преодолению деформаций своего развития // Психологический журнал. 1999. Т. 20. № 1. С. 6-19.

11. Аронсон Э. Теория диссонанса: прогресс и проблемы // Современная зарубежная социальная психология. Тексты. М.: Изд-во МГУ, 1984. С. 111- 126.

12. Асмолов А. Г. Личность как предмет психологического исследования. — М.: Изд-во МГУ, 1981.

13. Бандура А., Уолтере Р. Принципы социального научения // Современная зарубежная социальная психология. Тексты. М: Изд-во МГУ, 1984. С. 55-60.

14. Бехтерева Н. П. Нейрофизиологические аспекты психической деятельности человека. Л.: Медицина, 1974.

15. Биопотенциалы мозга человека: математический анализ / Под ред. В. С. Русинова. М: Медицина, 1987.

16. Богданов В. А. Системологическое моделирование личности в социальной психологии. Л.: Изд-во ЛГУ, 1987.

17. Борисова Е. М., Гуревич К. М. Психологическая диагностика в школьной профориентации // Вопросы психологии. 1988. № 1.

18. Борисова Е. М., Логинова Г. П., Мдивани М. О. Диагностика управленческих способностей // Вопросы психологии. 1997. № 2. С. 112-121.

19. Братусь Б. С. К проблеме человека в психологии //Вопросы психологии. 1997. № 5. С. 3-19.

20. Брушлинский А. В. Проблема субъекта в психологической науке // Психологический журнал. 1993. Т. 14. № 6. С. 3-15.

21. Бурлачук Л. Ф. Психодиагностика личности. Киев: Здоровье, 1989.

22. Вартанова И. И. К проблеме диагностики мотивации // Вестник МГУ. Сер. 14, Психология. 1998. №2. С. 80-87.

23. Василевский Н. Н. Современные проблемы экологической физиологии. Л.: 1984.

24. Величковский Б. М. Об уровнях когнитивной организации: неоконченный сценарий Бернштейна // Вестник МГУ. Сер. 14. Психология, 1999. № 1. С. 3-13.

25. Вертгеймер М. Продуктивное мышление. М.: Прогресс, 1987.

26. Вилюнас В. К. Психологические механизмы биологической мотивации. М: Изд-во МГУ, 1986.

27. Водопьянова И. Е. Активная жизненная позиция личности и профессиональная адаптация в условиях социально-экономического кризиса // Психологические проблемы самореализации личности. Вып. 2. СПб.: Изд- во СПбГУ, 1998. С. 144-153.

28. Георгиевский А. Б. Эволюция адаптации (историко-методологическое исследование). Л.: Наука, 1989.

29. Данч И. Изменение профессиональной установки молодых рабочих // Вопросы психологии. 1985. № 4.

30. Дикая Л. Г., Махнач А. В. Отношение человека к неблагоприятным жизненным событиям и факторы его формирования // Психологический журнал. 1996. Т. 17. №3. С. 137-148.

31. Ермолаева Е. П. Преобразующие и идентификационные аспекты профессиогенеза // Психологический журнал. 1998. Т. 19. № 4. С. 80-87.

32. Журавлев А. Л. Социально-психологическая динамика в изменяющихся экономических условиях // Психологический журнал. 1998. Т. 19. № 3. С. 3-16.

33. Завалишина Д. И. Пространство проблем в практической деятельности // Психология и практика. Вып. 1. Ярославль, 1998. С. 55-56.

34. Илюхина В. А. Нейрофизиология функциональных состояний человека. Л.: Наука, 1986.

35. История зарубежной психологии: Тексты / Под ред. П. Я. Гальперина, А. II. Ждан. М.: Изд-во МГУ, 1986.

36. Казначеев В. П. Современные проблемы адаптации. — Новосибирск, 1980.

37. Карпов А. В. Психология менеджмента. М.: Гардарика, 1999.

38. Климов Е. А. Как выбирать профессию. М., 1984.

39. Кудрявцев В. Т. Историзм в психологии развития: от принципа к проблеме // Психологический журнал. 1996. Т. 17. Ms 1. С. 5-18.

40. Кудрявцев Т. В., Сухарев А. В. Влияние характерологических особенностей личности на динамику профессионального самоопределения // Вопросы психологии. 1985. № 1.

41. Куликов Л. В. Психология настроения личности: Автореф. дис. … докт. психол. наук. СПб., 1997.

42. Леонтьев Д. А. От социальных ценностей к личности: социогенез и феноменология ценностной регуляции деятельности // Вестник МГУ. Сер. 14, Психология. 1997. Ms 1. С. 20-27.

43. Лепский В. Е. Гармония субъективного и нормативного в условиях компьютеризации управленческой деятельности // Психологический журнал. 1997. Т. 18. № 4. С. 43-56.

44. Ливанов М. Н. Пространственная организация процессов головного мозга. М.: Наука, 1972.

45. Личность: определение и описание // Вопросы психологии. 1992. № 3-4. С. 34-42.

46. Ломов Б. Ф. Методологические и теоретические проблемы психологии. М.: 1984.

47. Лоренц К. Агрессия. М.: Педагогика, 1994.

48. МаслоуА. X. Новые рубежи человеческой природы. М.: Смысл, 1998.

49. Милнер П. Физиологическая психология. М.: Мир, 1973.

50. Мильруд Р. П. Зависимость зрительных иллюзий от уровня познавательного развития // Вопросы психологии. 1997. М 1. С. 114-120.

51. Найссер У. Познание и реальность. М.: Прогресс, 1981.

52. Нартова-Бочавер С. К. «Coping behavior» в системе понятий психологии личности // Психологический журнал. 1997. Т. 18. № 5. С. 20-30.

53. Общая психодиагностика / Под ред. А. А. Бодалева, В. В. Столица. М.: Изд-во МГУ, 1987.

54. Осницкий А. К., Чуйкова Т. С. Саморегуляция активности субъекта в ситуации потери работы // Вопросы психологии. 1999. № 1. С. 92-104.

55. Пиаже Ж. Избранные психологические труды. М.: Просвещение, 1969.

56.Платонов К. К. Структура и развитие личности. М.: Наука, 1986.

57. Плюснин Ю. М., Путилов А. А. Биоритмологические корреляты личностных черт // Психологический журнал. 1990. Т. 11. № 6. С. 47-50.

58. Профессионализм в системе государственной службы / Игнатов В. Г., Белолипецкий В. К., Понеделков А. В. и др. Ростов-н/Д: Изд-во СКНЦ ВШ, 1997.

59. Рабочая книга практического психолога: технология эффективной профессиональной деятельности: Пособие для специалистов, работающих с персоналом). Под ред. А. А. Деркача. М.: Изд. дом «Красная площадь», 1996.

60. Реан А. А. Агрессия и агрессивность личности // Психологический журнал. 1996. Т. 17. № 5. С. 3-18.

61. Реан А. А. Акмеология личности // Психологический журнал. Т. 1. № 3. 2000. С. 88-95.

62. Реан А. А. К проблеме социальной адаптации личности // Вестник СПбГУ. Сер. 6., 1995. Вып. 3. С. 74-79.

63. Реан А. А. Психология изучения личности: Учебное пособие. СПб., 1999.

64. Реан А. А., Коломинский Я. Л. Социальная педагогическая психология. — СПб.: Питер Ком, 1999.

65. Рогов М. Г. Структура мотивации учения в системе непрерывного профессионального образования // Психология и практика. Т. 4. Вып. 2. Ярославль, 1998. С. 174-175.

66. Рубинштейн С. Л. Основы общей психологии: В 2 т. М.: Педагогика, 1989.

67. Свенцицкий А. Л. Социальная психология управления. Л.: Изд-во ЛГУ, 1986.

68. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме. М.: Медгиз, 1960.

69. Селье Г. Стресс без дистресса. М.: Прогресс, 1979.*

70. Слободчиков В. И., Исаева Н. А. Психологические условия введения студентов в профессию педагога // Вопросы психологии. 1996. № 4. С. 72-80.

71. Слуцкий В. М., Моррис А. К. Когнитивные механизмы способности рассуждать у подростка: вклад культурных и образовательных факторов // Психологический журнал. 1997. Т. 18. № 2. С. 79-96.

72. Собчик Л. Н., Лобанова Т. Н. Психодиагностические критерии руководящих кадров // Психологический журнал. 1989. Т. 10. № 1. С. 42-48.

73. Степанова С. И. Актуальные проблемы космической биоритмологии. М.: Наука, 1977.

74. Степанова С. И. Биоритмологические аспекты проблемы адаптации. М.: Наука, 1986.

75. Суходольский Г. В. Основы психологической теории деятельности. Л.: Изд-во ЛГУ, 1988.

76. Таранов Е. В. Адаптация молодого рабочего па промышленном предприятии // Проблемы психологии личности. М.: Наука, 1982. С. 83-88.

77. Франки В. Человек в поисках смысла. М.: Прогресс, 1990.

78. Фромм Э. Иметь или быть / Пер. с англ. М.: Прогресс, 1990.

79. Харрисон Дж. и др. Биология человека. М.: Мир, 1979.

80. Чугунова Э. С. Формирование и развитие технического творчества молодых рабочих. М: Высш. школа, 1979.

81. Чудновский В. Э. Смысл жизни: проблемы относительной эмансипированности от «внешнего» и «внутреннего» // Психологический журнал. 1995. Т. 16. №2. С. 15-26.

82. Шапкин С. А., Дикая Л. Г. Деятельность в особых условиях: компонентный анализ структуры и стратегии адаптации // Психологический журнал. 1996. Т. 17. № 1. С. 19-34.

83. Шварцер Р., Еруселем М., Ромек В. Русская версия шкалы общей самоэффективности Р. Шварцера и М. Еруселема // Иностранная психология. 1996. № 7. С. 71-76.

84. Швырков В. Б. Нейрофизиологическое изучение структуры психики // Мозг и психическая деятельность. М.: Наука, 1984.

 

2. Стресс и стрессоустойчивость личности

 
 
                                 МЕТОДИКА:                                  
                  Мотивация профессиональной деятельности                   
                               (К. Замфир)                                  
                         (модификация А. А. Реана).                         
 
      Методика может применяться для диагностики мотивации профессиональной 
 деятельности. В основу положена концепция о внутренней и  внешней  мотива- 
 ции.                                                                       
      О внутренней мотивации следует говорить,  когда  для  личности  имеет 
 значение деятельность сама по себе. Если же в основе мотивации  профессио- 
 нальной деятельности лежит стремление к удовлетворению иных  потребностей, 
 внешних по отношению к содержанию самой деятельности  (мотивы  социального 
 престижа, зарплаты и т.  д.), то в данном случае принято говорить о внешней 
 мотивации.                                                                 
      Сами внешние мотивы дифференцируются на внешние положительные и внеш- 
 ние отрицательные. Внешние положительные мотивы, несомненно, более  эффек- 
 тивны и более желательны со всех точек зрения, чем  внешние  отрицательные 
 мотивы.                                                                    
 
      Обработка результатов.                                                
      После заполнения листа ответов подсчитываются  показатели  внутренней 
 мотивации (ВМ), внешней положительной (ВПМ) и                              
 внешней отрицательной  мотивации (ВОМ) в соответствии со следующими ключами: 
      ВМ  = (6 + 7)/2.                                                      
      ВПМ = (1 + 2 +5)/3.                                                   
      ВОМ = (3 + 4)/2.                                                      
      Показателем выраженности каждого типа мотивации будет  число,  заклю- 
 ченное в пределах от 1 до 5 (в том числе возможно и дробное).               
 
      Интерпретация данных.                                                 
      На основании полученных результатов определяется мотивационный  комп- 
 лекс личности - соотношение между собой трех видов мотивации:  ВМ,  ВПМ  и 
 ВОМ.                                                                       
 
      К наилучшим, оптимальным, мотивационным комплексам следует относить   
 следующие два типа сочетаний:                                              
      ВМ > ВПМ > ВОМ.                                                       
      ВМ = ВПМ > ВОМ.                                                       
 
      Наихудшим мотивационным комплексом является тип ВОМ > ВПМ > ВМ.       
 
      Любые другие сочетания являются промежуточными с точки зрения их  эф- 
 фективности.                                                               
 
      При интерпретации следует учитывать не только мотивационное соотноше- 
 ние, но и показатели отдельных видов мотивации.                             
      Например, нельзя два нижеприведенных мотивационных комплекса  считать 
 абсолютно одинаковыми:                                                     
      ВМ  ВПМ ВОМ                                                           
      1	   2   5                                                            
      2    3   4                                                            
      Оба они относятся к одному и тому же неоптимальному типу:             
      ВОМ > ВПМ > ВМ.                                                       
      Однако видно, что в первом  случае  мотивационный  комплекс  личности 
 значительно негативнее, чем во втором. Во втором  случае  по  сравнению  с 
 первым имеет место снижение показателя внешней отрицательной  мотивации  и 
 повышение показателей внешней положительной и внутренней мотивации.        
 
      Примечания к компьютерной версии.                                     
      В данной программе автоматическая интерпретация тестовых  показателей 
  основана на следующих условных критериях:                                 
      1 -  низкий показатель;                                               
      2 -  пониженный показатель;                                           
      3 -  средний показатель;                                              
      4 -  повышенный показатель;                                           
      5 -  высокий показатель.                                               
 
      Опросник состоит из 7 вопросов.                                       
      Примерное время тестирования 3-5 минут.                               
 
 
                           ПРИМЕР ТЕСТИРОВАНИЯ:                             
 
                                   ---                                      
 
                       ПСИХОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА.                        
 
 Методика: Мотивация профессиональной деятельности.                         
 Ф.И.О:____________________                                                 
 Доп. данные:______________                                                 
 
 
                             Диаграмма:                                     
 
    ВМ  ╟─▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▓▓▓▓▓▓▓▓▓▓████████████████████─╢>             
 
    ВПМ ╟─▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▓▓▓▓▓▓▓▓▓▓─────────────────────╢>             
 
    ВОМ ╟─▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▒▓▓▓▓▓▓▓▓▓▓██████████───────────╢>             
 
                          
 
 
 
                        Tестовые показатели:                                
 
          1.  Внутренняя мотивация             -  ВМ  =  5.00                
          2. Внешняя положительная мотивация  -  ВПМ =  3.00                
          3. Внешняя отрицательная мотивация  -  ВОМ =  4.00                
 
 
                           ИНТЕРПРЕТАЦИЯ:                                   
 
      Высокий уровень внутренней мотивации. Для личности имеет зна-         
 чение удовлетворение от самого процесса и результата работы и воз-         
 можность наиболее полной самореализации именно в  данной  деятель-         
 ности.                                                                     
 
      Средний уровень внешней положительной мотивации  связанной  с         
 потребностью в достижении социального престижа и уважения со  сто-         
 роны других, стремлением к продвижению по службе,  денежным  зара-         
 ботком.                                                                    
 
      Повышенный уровень внешней отрицательной мотивации,  отражаю-         
 щей стремление избежать критики со стороны руководителя  или  кол-         
 лег, а также возможных наказаний или неприятностей.                         
 


Мотивация профессиональной деятельности

Mетодика К. Замфир в модификации А. А. Реана

Методика может применяться для диагностики мотивации профессиональной деятельности, в том числе мотивации профессионально-педагогической деятельности. В основу положена концепция о внутренней и внешней мотивации. Напомним, что о внутренней мотивации следует говорить, когда для личности имеет значение деятельность сама по себе. Если же в основе мотивации профессиональной деятельности лежит стремление к удовлетворению иных потребностей, внешних по отношению к содержанию самой деятельности (мотивы социального престижа, зарплаты и т.д.), то в данном случае принято говорить о внешней мотивации. Сами внешние мотивы дифференцируются на внешние положительные и внешние отрицательные. Внешние положительные мотивы, несомненно, более эффективны и более желательны со всех точек зрения, чем внешние отрицательные мотивы.

Инструкция.
Прочитайте нижеперечисленные мотивы профессиональной деятельности и дайте оценку их значимости для Вас по пятибалльной шкале.

Лист ответов

Обработка результатов
После заполнения листа ответов подсчитываются показатели внутренней мотивации (ВМ), внешней положительной (ВПМ) и внешней отрицательной мотивации (ВОМ) в соответствии со следующими ключами:
ВМ = (6+7)/2
ВПМ = 1+2+5)/3 ВОМ = (3+4)/2
Показателем выраженности каждого типа мотивации будет число, заключенное в пределах от 1 до 5 (в том числе возможно и дробное).

Интерпретация данных
На основании полученных результатов определяется мотивационный комплекс личности — соотношение между собой трех видов мотивации: ВМ, ВПМ и ВОМ.
К наилучшим, оптимальным, мотивационным комплексам следует относить следующие два типа сочетаний:

ВМ > ВПМ > ВОМ и ВМ = ВПМ > ВОМ.

Наихудшим мотивационным комплексом является тип ВОМ > ВПМ > ВМ.

Любые другие сочетания являются промежуточными с точки зрения их эффективности.

При интерпретации следует учитывать не только мотивационное соотношение, но и показатели отдельных видов мотивации.

Например, нельзя два нижеприведенных мотивационных комплекса считать абсолютно одинаковыми:

Оба они относятся к одному и тому же неоптимальному типу: ВОМ > ВПМ > ВМ. Однако видно, что в первом случае мотивационный комплекс личности значительно негативнее, чем во втором. Во втором случае по сравнению с первым имеет место снижение показателя внешней отрицательной мотивации и повышение показателей внешней положительной и внутренней мотивации.

По нашим данным, удовлетворенность профессией имеет значимые корреляционные связи с оптимальностью мотивационного комплекса педагога (положительная значимая связь, г = +0,409). Иначе говоря, удовлетворенность педагога избранной профессией тем выше, чем оптимальнее у него мотивационный комплекс: высокий вес внутренней и внешней положительной мотивации и низкий — внешней отрицательной. Кроме того, нами установлена и отрицательная корреляционная зависимость между оптимальностью мотивационного комплекса и уровнем эмоциональной нестабильности личности педагога (связь значимая, г = -0,585). Чем оптимальнее мотивационный комплекс, чем более активность педагога мотивирована самим содержанием педагогической деятельности, стремлением достичь в ней определенных позитивных результатов, тем ниже эмоциональная нестабильность. И наоборот, чем более деятельность педагога обусловлена мотивами избегания, порицания, желанием «не попасть впросак» (которые начинают превалировать над мотивами, связанными с ценностью самой педагогической деятельности, а также над внешней положительной мотивацией), тем выше уровень эмоциональной нестабильности.

Изучение мотивации профессиональной деятельности, Профориентационные методики

метки: Внешний, Мотив, Комплекс, Мотивационный, Положительный, Отрицательный, Мотивация, Зрение

Методика может применяться для диагностики мотивации профессиональной деятельности. В основу положена концепция о внутренней и внешней мотивации. О внутреннем типе мотивации следует говорить, когда для личности имеет значение деятельность сама по себе. Если же в основе мотивации профессиональной деятельности лежит стремление к удовлетворению иных потребностей внешних по отношению к содержанию самой деятельности (мотивы социального престижа, зарплаты и т.д.), то в данном случае принято говорить о внешней мотивации. Сами внешние мотивы дифференцируются здесь на внешние положительные и внешние отрицательные. Внешние положительные мотивы, несомненно, более эффективны и более желательны со всех точек зрения, чем внешние отрицательные мотивы.

Инструкция: Прочитайте ниже перечисленные мотивы профессиональной деятельности и дайте оценку из значимости для Вас по пятибалльной шкале. Насколько для Вас актуален тот или иной мотив?

Бланк методики

в очень незначительной мере (1)

в достаточно незначительной мере (2)

в небольшой, но и в немаленькой мере (3)

в достаточно большой мере (4)

в очень большой мере (5)

Денежный заработок
Стремление к продвижению по работе
Стремление избежать критики со стороны руководителя или коллег
Стремление избежать возможных наказаний или неприятностей
Потребность в достижении социального престижа и уважения со стороны других
Удовлетворение от самого процесса и результата работы
Возможность наиболее полной самореализации именно в данной деятельности

Обработка результатов

Подсчитываются показатели внутренней мотивации (ВМ), внешней положительной (ВПМ) и внешней отрицательной (ВОМ) в соответствии со следующими ключами.

ВМ = (оценка пункта 6 + оценка пункта 7)/2

ВПМ = (оценка п.1 + оценка п.2 + оценка п.5)/3

ВОМ = (оценка п. З + оценка п. 4)/2

Показателем выраженности каждого типа мотивации будет число, заключенное в пределах от 1 до 5 (в том числе возможно и дробное).

Интерпретация

На основании полученных результатов определяется мотивационный комплекс личности. Мотивационный комплекс представляет собой тип соотношения между собой трех видов мотивации: ВМ, ВПМ и ВОМ.

К наилучшим, оптимальным, мотивационным комплексам следует относить следующие два типа сочетания: ВМ>ВПМ>ВОМ и ВМ=ВПМ>ВОМ.

Наихудшим мотивационным комплексом является тип ВОМ>ВПМ>ВМ.

Между этими комплексами заключены промежуточные с точки зрения их эффективности иные мотивационные комплексы.

При интерпретации следует учитывать не только тип мотивационного комплекса, но и то, насколько сильно один тип мотивации превосходит другой по степени выраженности.

По данным исследований, удовлетворенность профессией имеет значимые корреляционные связи с оптимальностью мотивационного комплекса (положительная значимая связь, r = + 0,409).

Иначе говоря, удовлетворенность избранной профессией тем выше, чем оптимальнее мотивационный комплекс: высокий вес внутренней и внешней положительной мотивации и низкий — внешней отрицательной.

Чем оптимальнее мотивационный комплекс, чем более активность мотивирована самим содержанием деятельности, стремлением достичь в ней определенных позитивных результатов, тем ниже эмоциональная нестабильность. И наоборот, чем более деятельность обусловлена мотивами избегания, порицания, желанием «не попасть впросак» (которые начинают превалировать над мотивами, связанными с ценностью самой деятельности, а также над внешней положительной мотивацией), тем выше уровень эмоциональной нестабильности.

(Источник: Реан А.А. Психология и психодиагностика личности: Теория, методы исследования, практикум. – СПб.: Прайм-ЕВРОЗНАК, 2006. С. 84-86) 

Методика автоматизированной отладки программного обеспечения

Ссылки

[1] А. В. Ахо, Р. Сетхи и Дж. Д. Ульман. Компиляторы: принципы,

техники и инструменты. Addison-Wesley Longman Publishing

Co., Inc., Бостон, Массачусетс, США, 1986.

[2] Г. Алтекар и И. Стойка. ODR: детерминированное на выходе воспроизведение

для многоядерных программ. В Symp. по операционным системам Prin-

ciples, 2009.

[3] П. Бунстоппель, К. Кадар и Д. Р. Энглер.RWset: Атака на

взрыва пути в генерации тестов на основе ограничений. В инструментах

и алгоритмах построения и анализа систем,

2008.

[4] Д. Брамли, Х. Ван, С. Джа и Д. Сонг. Создание сигнатуры способностей vulner-

с использованием самых слабых предварительных условий. In Computer

Security Foundations Symp., 2007.

[5] Д. Брамли, П. Пусанкам, Д. Сонг и Дж. Чжэн. Возможна автоматическая генерация эксплойтов

на основе патчей: методы и последствия

. В IEEE Symp. по безопасности и конфиденциальности, 2008.

[6] К. Кадар, Д. Данбар и Д. Р. Энглер. KLEE:

без поддержки и автоматическая генерация тестов с высоким уровнем покрытия для сложных системных программ

. В Symp. по проектированию операционных систем

и внедрению, 2008.

[7] М. Кастро, М. Коста и Ж.-П. Мартин. Лучшее сообщение об ошибке

с лучшей конфиденциальностью. В Intl. Конф. по архитектурной поддержке

языков программирования и операционных систем, 2008.

[8] В. Чипунов, В. Георгеску, К. Замфир, Г. Кандеа. Se-

лективное символическое исполнение. В семинаре по горячим темам в

надежных системах, 2009.

[9] Дж. Чоу, Т. Гарфинкель и П. М. Чен. Отделение динамического анализа программы

от выполнения в виртуальных средах. В

Ежегодная техническая конференция USENIX, 2008.

[10] М. Коста, Дж. Кроукрофт, М. Кастро, А. Роустрон, Л. Чжоу,

Л. Чжан и П. Бархам. Vigilante: Сквозное сдерживание

интернет-червей. В Symp. по принципам операционных систем,

2005.

[11] М. Коста, М. Кастро, Л. Чжоу, Л. Чжан и М. Пейнадо.

Bouncer: защита программного обеспечения путем блокировки неверного ввода. В Symp.

по принципам операционных систем, 2007.

[12] Дж. У. Данлэп, С. Т. Кинг, С. Чинар, М. Басрай и П. М. Чен.

ReVirt: включение анализа вторжений с помощью виртуальной машины

ведение журнала и воспроизведение. В Symp. по разработке операционных систем

и внедрению, 2002.

[13] Дж. У. Данлэп, Д. Луккетти, П. М. Чен и М. Феттерман.

Воспроизведение выполнения на многопроцессорных виртуальных машинах. В Intl.

конф. по средам виртуального исполнения, 2008.

[14] Д. Энглер и К. Эшкрафт. RacerX: эффективное статическое обнаружение

состояний гонки и взаимоблокировок. В Symp. on Operating

Systems Principles, 2003.

[15] J. Gait. Пробный эффект в параллельных программах. Программное обеспечение:

Практика и опыт, 16 (3), 1986.

[16] Ghttpd. Уязвимость функции журнала Ghttpd, связанной с переполнением буфера.

http://www.securityfocus.com/bid/5960, 2010.

[17] П. Годфроид и Н. Нагаппан. Параллелизм в Microsoft

— Предварительный обзор. В CAV Workshop on Exploiting

Concurrency Efciently and Correctly, 2008.

[18] П. Годфроид, Н. Кларлунд и К. Сен. DART: Направлял автоматическое

произвольное тестирование. В конф. по языку программирования

«Проектирование и реализация», 2005 г.

[19] П. Годфроид, М. Ю. Левин, Д. Мольнар. Automated White-

box Fuzz Testing. In Network and Distributed System Security

Symp., 2008.

[20] Z. Guo, X. Wang, J. Tang, X. Liu, Z. Xu, M. Wu, MF

Kaashoek, and Z. Чжан. R2: Ядро уровня приложения для записи и воспроизведения

. В Symp. по проектированию операционных систем и внедрению

, 2008.

[21] П. Джоши, К.-С. Парк, К. Сен и М. Найк. Метод рандомизированного динамического анализа программ

для обнаружения реальных мертвых замков

. В конф. по разработке и внедрению языков программирования

, 2009.

[22] Х. Джула, Д. Траламацца, К. Замфир и Г. Кандеа. Dead-

иммунитет к блокировке: позволяет системам защищаться от взаимоблокировок.

В Symp. по разработке и внедрению операционных систем,

2008.

[23] Дж. К. Кинг. Символьное исполнение и тестирование программы. Commu-

сообщений ACM, 1976.

[24] С. Т. Кинг, Г. В. Данлэп и П. М. Чен. Отладка

операционных систем с виртуальными машинами, путешествующими во времени.В

Ежегодная техническая конференция USENIX, 2005.

[25] Л. Лампорт. Время, часы и порядок событий в распределенной системе

. Сообщения ACM, 21 (7), 1978.

[26] К. Латтнер и В. Адве. LLVM: Среда компиляции для непрерывного анализа и преобразования

программ. В Intl. Symp.

по генерации кода и оптимизации, 2004.

[27] С. Лу, С. Парк, Э. Сео и Ю. Чжоу. Учимся на ошибках —

всестороннее исследование реальных характеристик ошибок параллелизма —

теристики. В Intl. Конф. по архитектурной поддержке программ —

языков и операционных систем, 2008.

[28] C.-K. Лук, Р. Кон, Р. Мут, Х. Патил, А. Клаузер, Г. Лоуни,

С. Уоллес, В. Дж. Редди и К. Хейзелвуд. ПИН: сборка

специализированных программных средств анализа с динамическими приборами

tation. В конф. по разработке и внедрению языков программирования

, 2005.

[29] М. Мусувати, С. Кадир, Т. Болл, Г. Баслер, П. А.Найнар, и

И. Нямтиу. Поиск и воспроизведение Heisenbugs в параллельных программах аренды

. В Symp. по проектированию операционных систем и внедрению

, 2008.

[30] С. Нараянасами, З. Ван, Дж. Тигани, А. Эдвардс и

Б. Колдер. Автоматическая классификация доброкачественных и опасных данных

гонок с использованием анализа воспроизведения. Конф. по языку программирования

Дизайн и реализация, 2007.

[31] Национальный институт стандартов и технологий.Безопасный хеш

стандарт

(SHS). FIPS PUB 180-3, октябрь 2008 г.

[32] Ohloh. Анализ кода Ohloh SQLite.

https://www.ohloh.net/p/sqlite/analyses/467152, 2009.

[33] S. Park, W. Xiong, Z. Yin, R. Kaushik, KH Lee, S. Lu, и

Y. Zhou. Вы должны воспроизвести ошибку при первой попытке воспроизведения

? — PRES: вероятностное воспроизведение с выполнением

эскизов на мультипроцессорах. В Symp. on Operating

Systems Principles, 2009.

[34] С. Сэвидж, М. Берроуз, Г. Нельсон, П. Собальварро и

Т. Андерсон. Eraser: динамический детектор гонки данных для

многопоточных программ. Транзакции ACM на компьютере

Systems, 15 (4), 1997.

[35] К. Сен. Рейс направил случайное тестирование параллельных

программ. Конф. по разработке языков программирования и реализации

, 2008.

[36] SQLite. SQLite. http://www.sqlite.org/, 2010.

[37] М. Вайзер. Программа нарезки.В Intl. Конф. по программному обеспечению

Engineering, 1981.

История Casper — Глава 2 | Автор: Влад Замфир

Репост из блога Ethereum.

В этой главе описывается теория игр и моделирование экономической безопасности, которые мы делали осенью 2014 года. В ней рассказывается, как «модель взломщика злоумышленника» привела наше исследование непосредственно к радикальному решению проблемы атак на большие расстояния.

Мы с Виталиком обсуждали стимулы в рамках нашего исследования еще до того, как встретились, поэтому утверждение о том, что «правильное использование стимулов» имеет решающее значение для подтверждения ставки, никогда не было предметом споров. Мы никогда не были готовы принять «половина монет честные» в качестве предположения безопасности. (выделено жирным шрифтом, потому что это важно.) Мы знали, что нам нужна некоторая «совместимость стимулов» между стимулами для связанных узлов и гарантиями безопасности протокола.

Мы всегда считали, что протокол можно рассматривать как игру, которая может легко привести к «плохим результатам», если стимулы протокола будут поощрять такое поведение. Мы расценили это как потенциальную проблему безопасности. Залоговые депозиты дали нам четкий способ наказать за плохое поведение; Условия сокращения, которые в основном представляют собой программы, которые решают, уничтожать ли депозит.

Мы давно наблюдали, что Биткойн был более безопасным, когда цена биткойна была выше, и менее защищенной, когда она была ниже. Мы также теперь знали, что залоговые депозиты обеспечивают большую экономическую эффективность слэшера, чем слэшер, только за вознаграждение. Нам было ясно, что экономическая безопасность существует, и мы сделали ее своим приоритетом.

Я не уверен, насколько Виталик имел опыт в теории игр (хотя было ясно, что у него было больше, чем у меня). Мои собственные знания теории игр в начале истории были еще более минимальными, чем в конце.Но я знал, как распознавать и вычислять равновесия по Нэшу. Если вы еще не знакомы с Equilibriums Нэша, следующий абзац для вас.

Равновесие по Нэшу — это профиль стратегии (выбор стратегии игроков) с соответствующей выплатой (отдавая $ ETH или забирая $ ETH), при которой ни один из игроков не имеет индивидуального стимула к отклонению. «Стимул к отклонению» означает «они получат больше ETH, если каким-то образом изменит то, что они делают». Если вы это запомните и каждый раз, когда вы слышите «Эквильбриум Нэша», вы думаете, что «нет очков для изменения индивидуальной стратегии», вы все поймете.

Где-то в конце лета 2014 года я впервые столкнулся с «моделью злоумышленника с подкупом», когда я небрежно ответил на вопрос экономической безопасности, который Виталик задал мне во время звонка по Skype («Я могу просто дать им взятку») . Не знаю, откуда у меня идея. Затем Виталик снова спросил меня об этом, может быть, через неделю или две, заставив меня задуматься над дальнейшим развитием.

Подкупая участников игры, вы можете изменять выплаты в игре и посредством этой операции изменять ее равновесия по Нэшу. Вот как это может выглядеть:

Загрузка изображения прервана, так что … посмотрите здесь: http://i.imgur.com/owE9V4c.png

Взятка изменяет равновесие Нэша в игре «Дилемма заключенного» из (Up, Слева) на (Вниз, Вправо). Взятка нападающего в этом примере стоит 6, если сыграно (Вниз, Вправо).

Взломщик был нашей первой полезной моделью экономической безопасности.

До атаки с подкупом мы обычно думали об экономических атаках как о враждебных захватах иностранными, внепротокольными покупателями токенов или майнинговых мощностей.Для атаки на блокчейн в систему должна войти куча внешнего капитала. В связи с атакой со взяточничеством возник вопрос: «Какова цена подкупа существующих в настоящее время узлов для достижения желаемого результата?».

Мы надеялись, что подкупные атаки нашего еще не определенного протокола Proof-of-Stake потребуют больших затрат на компенсацию потерянных депозитов.

Не говоря уже о спорах о «разумности», это был наш первый шаг в обучении рассуждать об экономической безопасности.Было весело и просто использовать взломщика. Вы просто видите, сколько вы должны заплатить игрокам, чтобы они делали то, что хочет атакующий. И мы уже были уверены, что сможем убедиться, что злоумышленник должен дать взятку в размере гарантийного депозита, чтобы вернуть цепочку при попытке двойного расходования средств. Мы знали, что можем распознать «двойное подписание». Таким образом, мы были почти уверены, что это даст протоколу Proof-of-Stake ощутимое преимущество в экономической безопасности по сравнению с протоколом Proof-of-Work, с которым сталкивается взломщик.

Виталик и я применили взломщика к нашему исследованию доказательства доли владения. Мы обнаружили, что протоколы PoS без гарантийных депозитов можно легко победить с помощью небольших взяток. Вы просто платите держателям монет, чтобы они переместили их монеты на новые адреса и дали вам ключ от их теперь пустых адресов. (Я не уверен, кто изначально придумал эту идею.) Наша настойчивость в использовании модели взяточничества легко исключила все известные нам протоколы подтверждения ставки. Мне это понравилось. (В то время мы еще не слышали о Tendermint Дже Квона, о ныне не существующей Pebble Доминика Уильяма или о титрах Ника Уильямсона. )

Эта взяточная атака также бросила вызов доказательству доли владения на основе залогового депозита: в тот момент, когда залог был возвращен его первоначальному владельцу, взяточник мог купить ключи от своего связанного адреса заинтересованного лица с минимальными затратами.

Эта атака идентична атаке на большом расстоянии. Он получает старые ключи, чтобы взять под контроль цепочку блоков. Это означало, что злоумышленник может произвольно создавать «ложные истории». Но только если они начинаются с высоты, с которой истекают все вклады.

Таким образом, прежде чем приступить к настройке стимулов для нашего протокола Proof-of-Stake, нам нужно было решить проблему дальних атак. Если бы мы не решили проблему атак на большие расстояния, клиенты не смогли бы достоверно узнать, у кого на самом деле был залоговый депозит.

Мы знали, что контрольные точки разработчика могут использоваться для решения проблемы дальних атак. Мы думали, что это явно слишком централизованно.

Через несколько недель после моего перехода на Proof-of-Stake, когда я останавливался в доме Стефана Туала за пределами Лондона, я обнаружил, что существует естественное правило для рассуждений клиентов о залогах. Подписанные обязательства имеют смысл только в том случае, если отправитель в настоящее время имеет депозит. То есть после снятия депозита подписи от этих узлов теряют смысл. Почему мне доверять вам после того, как вы сняли свой депозит?

Этого требовала модель взяточничества. Взломщику почти ничего не стоило бы нарушить взятые на себя обязательства после снятия депозита.

Это означало, что клиент будет хранить список связанных узлов и останавливать блоки у двери, если они не были подписаны одним из этих узлов. Игнорирование консенсусных сообщений от узлов, у которых в настоящее время нет залоговых депозитов, решает / обходит проблему атаки на большие расстояния. Вместо аутентификации текущего состояния на основе истории, начиная с блока генезиса, мы аутентифицируем его на основе списка тех, у кого в настоящее время есть депозиты.

Это радикально отличается от доказательства работы.

В PoW блок действителен, если он привязан к генезисному блоку и если хэш блока соответствует требованиям сложности для его цепочки.В этой модели на основе гарантийного депозита блок действителен, если он был создан заинтересованной стороной с текущим существующим депозитом. Это означало, что вам потребуется текущая информация для аутентификации блокчейна. Эта субъективность вызвала серьезную озабоченность у многих людей, но необходимо, чтобы основанное на гарантийном депозите доказательство доли владения было защищено от взломщика.

Это осознание ясно дало мне понять, что модель безопасности Proof-of-Work и модель безопасности Pro-of-Stake принципиально несовместимы.Поэтому я отказался от любого серьезного использования «гибридных» решений PoW / PoS. Попытка аутентифицировать блокчейн с доказательством ставки от Genesis теперь казалась совершенно очевидной ошибкой.

Однако, помимо изменения модели аутентификации, нам нужно было предоставить способ управления этими списками гарантийных депозитов. Нам пришлось использовать подписи от связанных узлов для управления изменениями в списке связанных узлов, и мы должны были сделать это после того, как связанные узлы придут к консенсусу по этим изменениям. В противном случае у клиентов были бы разные списки связанных валидаторов, и поэтому они не смогли бы согласовать состояние Ethereum.

Время облигации должно быть долгим, чтобы у клиентов было время узнать о новой, входящей группе связанных заинтересованных сторон. Пока клиенты были в сети, они могли идти в ногу со временем. Я думал, что мы будем использовать twitter, чтобы поделиться списком связанных узлов или, по крайней мере, хешем, чтобы новые клиенты и клиенты, находящиеся в спящем режиме, могли синхронизироваться после того, как их пользователь введет хеш в пользовательский интерфейс.

Если у вас неправильный список валидаторов, вы можете получить посредственный . Но все не так уж плохо. Аргумент был (и остается!), Что вам нужно доверять внешнему источнику этой информации только один раз . После этого вы сможете обновлять свой список самостоятельно — по крайней мере, если вы сможете быть в сети достаточно регулярно, чтобы избежать «большого диапазона» снятых депозитов.

Я знаю, что к этому нужно привыкнуть. Но мы можем рассчитывать только на свежие гарантийные депозиты. Виталик сначала немного смутился с этим аргументом, пытаясь удержать возможность аутентификации из генезиса, но в конечном итоге был убежден в необходимости такого рода субъективности в протоколах подтверждения доли.Виталик независимо разработал свое слабое правило оценки субъективности, которое казалось мне в то время вполне разумной альтернативой моей идее, которая заключалась в основном «подписать все депозиты каждый N-й блок для обновления списка связанных узлов».

Когда гвозди в гробах «ничего не поставлено на карту» и гроба дальнего нападения были полностью забиты, мы были готовы начать выбирать условия для рубки.

В следующей главе будет задокументировано то, что мы узнали из наших первых попыток определить протокол консенсуса, указав условия косой черты.Я также расскажу вам, что мы узнали о наших исследованиях, разговаривая с хорошими людьми из нашего космоса. Представленная здесь история теории игр и экономического моделирования будет продолжена в главе 4.

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Есть много причин, по которым cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или уточнить у системного администратора.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Последние разработки и применения масс-спектрометрии диссоциации с переносом электрона в протеомике

  • Ahlf DR, Compton PD, Tran JC, Early BP, Thomas PM, Kelleher NL (2012) Оценка компактной высокополевой орбитальной ловушки для нисходящей протеомики клетки человека. J Proteome Res 11 (8): 4308–4314

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Alley WR Jr, Mechref Y, Novotny MV (2009) Характеристика гликопептидов путем объединения данных масс-спектрометрии диссоциации, вызванной столкновением, и диссоциации с переносом электрона. Rapid Commun Mass Spectrom 23: 161–170

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Alley WR Jr, Vasseur JA, Goetz JA, Svoboda M, Mann BF, Matei DE, Menning N, Hussein A, Mechref Y, Novotny MV (2012) N-связанные структуры гликанов и их экспрессия изменяются в сыворотке крови больных раком яичников.J Proteome Res 11: 2282–2300

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Breuker K, Oh H, Lin C, Carpenter BK, McLafferty FW (2004) Неэргодический и конформационный контроль диссоциации с захватом электрона катионами белка.Proc Natl Acad Sci USA 101: 14011–14016

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Catalina MI, Koeleman CA, Deelder AM, Wuhrer M (2007) Диссоциация с переносом электронов N-гликопептидов: потеря всей боковой цепи N-гликозилированного аспарагина. Rapid Commun Mass Spectrom 21: 1053–1061

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Катерман А.Д., Дурбин К.Р., Альф Д.Р., Early BP, Fellers RT, Tran JC, Thomas PM, Kelleher NL (2013) Крупномасштабная нисходящая протеомика протеома человека: мембранные белки, митохондрии и старение.Mol Cell Proteomics 12: 3465–3473

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Chen R, Wang F, Tan Y, Sun Z, Song C, Ye M, Wang H, Zou H (2012) Разработка комбинированного химического и ферментативного подхода для масс-спектрометрической идентификации и количественной оценки аберрантного N-гликозилирования . J Proteomics 75: 1666–1674

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Coon JJ, Shabanowitz J, Hunt DF, Syka JE (2005) Диссоциация пептидных анионов с переносом электрона. J Am Soc Mass Spectrom 16: 880–882

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Darula Z, Chalkley RJ, Lynn A, Baker PR, Medzihradszky KF (2011) Улучшенная идентификация O-связанных гликопептидов по данным ETD с оптимизированной оценкой для различных состояний заряда и специфичности расщепления. Аминокислоты 1: 321–328

    Статья Google ученый

  • Darula Z, Medzihradszky KF (2009) Аффинное обогащение и характеристика гликопептидов муцинового типа core-1 из бычьей сыворотки. Протеомика клеток Mol 8: 2515–2526

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Deguchi K, Ito H, Baba T., Hirabayashi A, Nakagawa H, Fumoto M, Hinou H, Nishimura S (2007) Структурный анализ O-гликопептидов с использованием многоступенчатых масс-спектров отрицательных и положительных ионов, полученных с помощью индуцированная столкновениями и электронно-захватная диссоциация в времяпролетной масс-спектрометрии с линейной ионной ловушкой.Rapid Commun Mass Spectrom 21: 691–698

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Dodds ED (2012) Газофазная диссоциация гликозилированных пептидных ионов. Масс-спектрометр. Ред. 31: 666–682

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Драбик А., Бодзон-Кулаковска А., Судер П. (2012) Применение реакций ETD / PTR в нисходящей протеомике как более быстрая альтернатива нано-восходящей идентификации белков с помощью наноЖХ-МС / МС.J Mass Spectrom 47: 1347–1352

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Fan Q, Amen M, Harden M, Severini A, Griffiths A, Longnecker R (2012) Вирус герпеса B использует человеческий нектин-1, но не HVEM или PILRα для слияния клеток с клетками и проникновения вируса.J Virol 86: 4468–4476

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Flangea C, Schiopu C, Capitan F, Mosoarca C, Manea M, Sisu E, Zamfir AD (2013) Полностью автоматизированный наноэлектроспрей на основе чипов в сочетании с диссоциацией с переносом электронов для высокопроизводительной нисходящей протеомики. Cent Eur J Chem 11: 25–34

    CAS Статья Google ученый

  • Форнелли Л, Дамок Э., Томас П.М., Келлехер Н.Л., Айзиков К., Денисов Э., Макаров А., Цыбин Ю.О. (2012) Анализ интактного моноклонального антитела IgG1 методом диссоциации с переносом электронов на орбитальной фурнитуре FTMS.Mol Cell Proteomics 11: 1758–1767

    PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Ghosh G, Adams JA (2011) Механизм фосфорилирования и структура серин-аргинин протеинкиназ. FEBS J 278: 587–597

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Guthals A, Bandeira N (2012) Идентификация пептидов с помощью тандемной масс-спектрометрии с альтернативными режимами фрагментации. Mol Cell Proteomics 9: 550–557

    Статья Google ученый

  • Halim A, Rüetschi U, Larson G, Nilsson J (2013) LC-MS / MS характеристика сайтов O-гликозилирования и гликановых структур гликопротеинов спинномозговой жидкости человека. J Proteome Res 12: 573–584

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Han H, Xia Y, Yang M, McLuckey SA (2008) Быстро чередующийся режим передачи, диссоциация с переносом электрона и активация столкновением для характеристики полипептидных ионов.Anal Chem 80: 3492–3497

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Hanisch FG (2012) O-гликопротеомика: сайт-специфический анализ O-гликопротеинов с помощью тандемной масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением CID / ETD и секвенирование гликопротеинов сверху вниз с помощью масс-спектрометрии распада в источнике MALDI. Методы Mol Biol 842: 179–189

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Хансен Т.А., Сильвестр М., Йенсен О.Н., Кьельдсен Ф. (2012) Автоматическая локализация сайта фосфорилирования белка с высокой степенью достоверности с использованием дополнительной тандемной масс-спектрометрии диссоциации, активируемой столкновением, и диссоциации с переносом электрона.Anal Chem 84: 9694–9699

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Hernandez-Aya LF, Gonzalez-Angulo AM (2011) Нацеленность на сигнальный путь фосфатидилинозитол-3-киназы при раке груди. Онколог 16: 404–414

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Hung CW, Tholey A (2012) Тандемная маркировка белков масс-тегами для нисходящей идентификации и количественной оценки. Anal Chem 84: 161–170

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Джонс А.В., Купер Х.Д. (2011) Методы диссоциации в протеомике на основе масс-спектрометрии.Аналитик 136: 3419–3429

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Ким М.С., Пандей А. (2012) Масс-спектрометрия диссоциации с переносом электронов в протеомике. Протеомика 12: 530–542

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Leitner A, Sturm M, Lindner W (2011) Инструменты для анализа фосфопротеома и других фосфорилированных биомолекул: обзор.Анальный химикат Acta 703: 19–30

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • MacLaine NJ, Hupp TR (2011) Как фосфорилирование контролирует p53. Ячейочный цикл 10: 916–921

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Манри Н., Сатаке Х., Канеко А., Хирабаяши А., Баба Т., Сакамото Т. (2013) Идентификация гликопептидов с использованием совместимой с жидкостной хроматографией диссоциации захвата горячих электронов в радиочастотной квадрупольной ионной ловушке.Anal Chem 85: 2056–2063

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Мао И., Валеха С.Г., Роуз Дж. К., Хендриксон К.Л., Маршалл А.Г. (2013) Структурный анализ интактного моноклонального антитела сверху вниз с помощью электронно-захватной диссоциации-преобразования Фурье ионно-циклотронного резонанса-масс-спектрометрии. Anal Chem 85: 4239–4246

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • McAlister GC, Russell JD, Rumachik NG, Hebert AS, Syka JE, Geer LY, Westphall MS, Pagliarini DJ, Coon JJ (2012) Анализ кислотного протеома с отрицательным электроном — масс-спектрометрия с переносной диссоциацией. Anal Chem 84: 2875–2882

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Mendoza JL, Schmidt A, Li Q, Nuvaga E, Barrett T, Bridges RJ, Feranchak AP, Brautigam CA, Thomas PJ (2012) Требования для эффективной коррекции CFTR ΔF508, выявленные в результате анализа эволюционирующих последовательностей.Ячейка 148: 164–174

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Palumbo AM, Reid GE (2008) Оценка газофазной перегруппировки и конкурирующих реакций фрагментации при назначении сайта фосфорилирования белка с использованием CID-MS / MS и MS 3 .Anal Chem 80: 9735–9747

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Palumbo AM, Smith SA, Kalcic CL, Dantus M, Stemmer PM, Reid GE (2011) Стратегии тандемной масс-спектрометрии для анализа фосфопротеома. Масс-спектрометр. Ред. 30: 600–625

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Perdivara I, Petrovich R, Allinquant B, Deterding LJ, Tomer KB, Przybylski M (2009) Выяснение структур O-гликозилирования белка-предшественника бета-амилоида с помощью жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии с использованием диссоциации с переносом электрона и столкновения диссоциация. J Proteome Res 8: 631–642

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Remmers N, Anderson JM, Linde EM, DiMaio DJ, Lazenby AJ, Wandall HH, Mandel U, Clausen H, Yu F, Hollingsworth MA (2013) Аберрантная экспрессия основных белков муцина и О-связанных гликанов, связанных с прогрессированием рака поджелудочной железы. Clin Cancer Res 19: 1981–1993

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Scott NE, Parker BL, Connolly AM, Paulech J, Edwards AV, Crossett B, Falconer L, Kolarich D, Djordjevic SP, Højrup P, Packer NH, Larsen MR, Cordwell SJ (2011) Одновременная характеристика гликанов и пептидов с использованием хроматографии гидрофильного взаимодействия и параллельной фрагментации с помощью CID, столкновительной диссоциации с более высокой энергией и диссоциации с переносом электрона МС, применяемого к N-связанному гликопротеому Campylobacter jejuni.Mol Cell Proteomics 10 (2): M000031 – MCP201 ​​

    PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Singh C, Zampronio CG, Creese AJ, Cooper HJ (2012) Масс-спектрометрия инициируемой ионами диссоциации с переносом электрона (ETD) продукта диссоциации с более высокой энергией столкновений (HCD) для анализа N-связанных гликопротеинов. J Proteome Res 11: 4517–4525

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Snovida SI, Bodnar ED, Viner R, Saba J, Perreault H (2010) Простая процедура на целлюлозной колонке для селективного обогащения гликопептидов и характеризации с помощью нано-ЖК в сочетании с тандемной массой с переносом электронов и столкновительной диссоциацией с высокой энергией спектрометрия.Carbohydr Res 345: 792–801

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Swaney DL, Wenger CD, Thomson JA, Coon JJ (2009) Фосфопротеом эмбриональных стволовых клеток человека, выявленный с помощью тандемной масс-спектрометрии диссоциации с переносом электрона. Proc Natl Acad Sci USA 106: 995–1000

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Thaysen-Andersen M, Wilkinson BL, Payne RJ, Packer NH (2011) Сайт-специфическая характеристика плотно O-гликозилированных пептидов муцинового типа с использованием диссоциации с переносом электрона ESI-MS / MS. Электрофорез 32: 3536–3545

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Винаик Р., Козлов Г., Геринг К. (2013) Структура некаталитического домена протеин-дисульфид-изомеразоподобного белка (PDIR) выявляет функцию связывания с белком. PLoS One 8 (4): e62021

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Wang D, Hincapie M, Rejtar T, Karger BL (2011) Сверхчувствительная характеристика сайт-специфического гликозилирования аффинно-очищенного гаптоглобина из плазмы крови пациента с раком легкого с использованием 10 мкм i.d. пористый слой, открытая трубчатая жидкостная хроматография-линейная ионная ловушка, вызванная столкновением диссоциация / масс-спектрометрия диссоциации с переносом электрона.Anal Chem 83: 2029–2037

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Wells JM, McLuckey SA (2005) Методы энзимологии, Биологическая масс-спектрометрия, том 402. Elsevier Academic Press, США, стр. 148–186

  • Wu SL, Hühmer AF, Hao Z, Karger BL (2007 Подход on-line LC-MS, сочетающий диссоциацию, индуцированную столкновением (CID), диссоциацию с переносом электрона (ETD) и CID изолированного вещества с пониженным зарядом, для характеристики следов белков с посттрансляционными модификациями.J Proteome Res 6: 4230–4244

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Yoshimura Y, Nudelman AS, Levery SB, Wandall HH, Bennett EP, Hindsgaul O, Clausen H, Nishimura S (2012) Выяснение способности лектинового домена UDP-GalNAc к распознаванию сахара: полипептид N-ацетил-галактозаминилтранс с использованием неестественных гликопептидных субстратов. Гликобиология 22: 429–438

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Заунер Г., Козак Р.П., Гарднер Р.А., Фернандес Д.Л., Дилдер А.М., Вухрер М. (2012) Анализ O-гликозилирования белков. Biol Chem 393: 687–708

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Zeng X, Hood BL, Sun M, Conrads TP, Day RS, Weissfeld JL, Siegfried JM, Bigbee WL (2010) Обнаружение биомаркеров сыворотки рака легких с использованием захвата гликопротеина и масс-спектрометрии жидкостной хроматографии. J Proteome Res 9: 6440–6449

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Zhang Q, Tang N, Brock JW, Mottaz HM, Ames JM, Baynes JW, Smith RD, Metz TO (2007) Обогащение и анализ неферментативно гликированных пептидов: боронатная аффинная хроматография в сочетании с масс-спектрометрией диссоциации с переносом электрона. J Proteome Res 6: 2323–2330

    CAS PubMed Central PubMed Статья Google ученый

  • Zhou Y, Dong J, Vachet RW (2011) Диссоциация с переносом электрона модифицированных пептидов и белков.Curr Pharm Biotechnol 12: 1558–1567

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Зубарев Р. (2006) Первичная структура белка с использованием методов ортогональной фрагментации в масс-спектрометрии с преобразованием Фурье.Expert Rev Proteomics 3: 251–261

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Зубарев Р.А. (2004) Электронно-захватная тандемная масс-спектрометрия. Curr Opin Biotechnol 15: 12–16

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • Нацеливание на модифицированные липиды во время рутинного липидомического анализа с использованием обращенно-фазовой жидкостной хроматографии HILIC и C30 в сочетании с масс-спектрометрией

    Анализ сложной стандартной смеси липидов с использованием HILIC или C30-RPLC-HRMS / MS

    Мы использовали систему растворителей, состоящую из ацетонитрил, вода и буфер ацетата аммония для HILIC-хроматографии, который эффективно разделил 15 классов липидов, присутствующих в сложной стандартной смеси липидов в режиме отрицательных ионов (рис.1а). Разделение классов липидов (межклассовая дифференциация) на основе состава их головной группы происходило в следующем порядке: SQDG, PG, DMPE, P-PC, PC, MMPE, O-PC, P-PE, SM, PI, P -LPE, LPE, PA, DLCL и, наконец, LPA (рис. 1a). По сравнению с HILIC, C30-RPLC, соединенный с HESI-MS в режиме отрицательных ионов, показан на рис. 1b для той же сложной смеси стандартов липидов. Здесь отмечается, что буферные условия на двух платформах были разными. Формиатный буфер использовали в методе C30RP, тогда как ацетатный буфер использовали в методе HILIC для оптимизации колонки.Следовательно, некоторые классы липидов образуют ацетатные аддукты [M + CH 3 COO] в условиях HILIC-MS и формиатные аддукты [M + HCOO] при выполнении C30-RPLC-MS. Наблюдаемая масса ( m / z ) и типы ионов каждого стандарта липидов из обеих хроматограмм включены в Таблицу S-1.

    Рисунок 1 Хроматограмма

    UHPLC-MS в режиме отрицательных ионов стандартной липидной смеси, полученной после ( a ) HILIC и ( b ) C30-RPLC.( c ) HILIC-MS спектр PI, элюированного через 22,54 мин, ( d ) C30-RPLC-MS спектр, показывающий PI, PG и DMPE, элюированный через 19,85 минуты. ( e , f ) МС / МС спектры PI 18: 0/20: 4 от HILIC и C30RPLC соответственно.

    Примеры спектров HILIC-HESI-MS и C30-RPLC-MS показаны на рис. 1c, d. Мы наблюдали, что PI 38: 4 элюируется через 22,54 мин в условиях HILIC вместе с другими видами PI (рис. 1c), тогда как PI 38: 4 наблюдается вместе с PG 34: 1 и DMPE 32: 0 в условиях C30RP (рис.1г). Типичная MS2-фрагментация иона PI 38: 4 [MH] m / z 885,55 была показана на рис. 1e, f с характеристическими ионами для диагностики головной группы инозита при m / z 241.01 и двух состав жирных кислот m / z 283,26 (C18: 0) и m / z 303,23 (C20: 4). Известно, что фрагментация PI является более сложной и отличается от других классов фосфолипидов, в которых интенсивность sn -2 FA, генерируемых из PI, относительно ниже или почти равна интенсивности иона sn- 1 жирной кислоты. 32,37 .Ион-продукт m / z 419,26, возникающий в результате дальнейшей потери инозита после первоначальной потери жирных кислот C20: 4 (т. е. m / z 581,31), преимущественно имел место в положении sn -2 37,38 . Это предпочтение было использовано для определения положений цепей FA на глицериновой основе PI. Таким образом, региохимическое определение соответствовало PI 18: 0/20: 4 из бычьей печени, включенной в стандартную смесь липидов. Спектр HRMS / MS HILIC (рис. 1e) сравнивался со спектром C30RP на (рис.1f), и все ионы основных фрагментов присутствовали в двух спектрах MS 2 , как и ожидалось. HRMS / MS позволила точно определить молекулярные частицы PI после хроматографии C30RP и HILIC.

    Мы оценили эффективность хроматографии HILIC при разделении репрезентативных модифицированных полярных липидов в сложной стандартной смеси. Оптимизация градиента подвижной фазы с использованием периода изократического элюирования, состоящего из 5% растворителя B, от 5 до 15 минут улучшила разделение модифицированных липидных подклассов в первой половине хроматограммы HILIC (рис.2а). Четкое разделение PE (22,25 мин), P-PE (21,29), MMPE (12,60 мин), DMPE (7,61 мин), P-PC (10,73 мин), O-PC (14,64), ПК (11,38 мин) и Стандарты SM (23,92 мин) были достигнуты. Модификация головной группы снизила полярность липидных соединений, тем самым значительно уменьшив время удерживания MMPE и DMPE. Масс-спектрометрия высокого разрешения (HRMS) позволила идентифицировать липидные изобары, связанные эфиром или сложным эфиром, в то время как репрезентативные подклассы и состав жирных кислот липидов, присутствующих в стандартной смеси, были проверены с помощью спектров HRMS / MS, как показано на рис.2 (б – я). Например, m / z 140 хорошо известно как характеристика немодифицированного класса липидов PE, представляющего головную группу фосфоэтаноламинов 39 , и двух жирных кислот, наблюдаемых при m / z 283,26 (C18: 0) и 303,23 (C20: 4) были получены из PE 18: 0/20: 4 [MH] , присутствующего в сложной стандартной смеси (фиг. 2b). Положение FA 18: 0 на sn -1 глицеринового остова было идентифицировано с помощью иона фрагмента лизоформы, i . и ., LPE 18: 0 наблюдается при m / z 480,31 на фиг. 2b (указан как характеристический ион для PE в таблице S-1. И наоборот, метилированные головные группы PE характеризуются увеличением на 14 Да для монометилфосфоэтаноламина N- ион ( m / z 154 для MMPE на рис. 2d) и 28 Да для N , N -диметилфосфоэтаноламин-ион ( m / z 168 для головной группы DMPE на рис. 2e). m / z 168 также присутствует в масс-спектрах PC и SM, связанных с деметилированием головной группы фосфохолина, и может быть дифференцирован от PE по спутнику CH 3 COOCH 3 потеря ( i . e ., -74 Да, наблюдаемые на рис. 2f – i).

    Рисунок 2

    ( a ) Хроматограмма HILIC-MS модифицированных липидов, показывающая разделение и сравнение классов липидов PE, P-PE, MMPE, DMPE, PG, PC, O-PC, P-PC и SM с отрицательными результатами. ионный режим. ( b i ) Спектры HILIC-MS / MS, полученные из стандартной смеси сложных липидов: ( b ) PE 18: 0/20: 4 [MH] при m / z 766,54, ( c ) плазмалоген PE P-18: 0/20: 4 [MH] m / z при 750. 54, ( d ) MMPE 16: 0/16: 0 [MH] при m / z 704,52, ( e ) DMPE 16: 0/16: 0 [MH] при m / z 718,54, ( f ) PC 18: 0/20: 4 [M + CH 3 COO] при m / z 818,59, ( г ) плазмалоген ПК P-18: 0/20: 4 [M + CH 3 COO] при m / z 852,61, ( h ) SM d18: 1/18: 0 [M + CH 3 COO] при m / z 789,61 и ( i ) диэфирный PC O-18: 0 / O-18: 0 [M + CH 3 COO] при m / z 820.68.

    Липиды плазмалогена были отделены от диацильных частиц в условиях HILIC, включая P-PE (21,29 мин) и P-PC (10,73 мин), согласно соответствующим спектрам MS / MS, показанным на фиг. 2c, g. Присутствие эфирных связей также снижает полярность липидов и уменьшает время их удерживания в условиях HILIC. По существу, плазмалогены PC и PE элюировались раньше, чем их диацильные партнеры, в соответствии с подтвержденной идентификацией спектрами HRMS / MS, показанными на фиг. 2b, c и фиг. 2f, g для сравнения.Тандемная масс-спектрометрия охарактеризовала головную группу как плазмалогена, так и диацила PC 18: 0/20: 4 по нейтральной потере 74 Да ( i , e ., -CH 3 COOCH 3 ). Эта нейтральная потеря, образующая ион продукта [M-CH 3 ] , известна как диагностический ион для липидов с холиновой функциональной группой в режиме отрицательных ионов 31 . Переход от сложноэфирной к эфирной связи привел к отсутствию m / z 283, представляющего стеариновую кислоту (C18: 0) из PC P-18: 0/20: 4.Ионы лизо-фрагмента из положения sn -1, наблюдаемые при m / z 508,34 и m / z 492,35, представляют собой LPC 18: 0 и LPC P-18: 0 [M-CH 3 ] ионов соответственно (рис. 2е, ж). Разделяя ту же головную группу фосфохолина, виды SM также производили характерную потерю 74 Да с компаньоном m / z 168, хотя их легко отличить от PC на основании точной массы иона-предшественника и фрагментации (Рис. 2h). Диэфирный стандарт PC O-18: 0 / O-18: 0 дает очень слабую фрагментацию из-за присутствия двойной эфирной связи, которая образует только один основной ион продукта при m / z 746.64 из-за потери CH 3 COOCH 3 возникает в результате деметилирования головной группы фосфохолина ( i , e ., -74 Да на фиг. 2i).

    Применение HILIC-хроматографии для анализа модифицированных (метилированных) липидов ПЭ в мембране почвенных микробов

    Сложный липидный профиль почвенных микробов исследовали методом HILIC в режиме отрицательных ионов (рис. 3а). Мы наблюдали присутствие монометилированного ПЭ (ММПЭ) в значительных количествах вместе с изомерными формами диацил-ПЭ в клеточной мембране почвенных микробов, живущих в прохладных климатических условиях в подзолистых почвах (рис.3). Хроматография HILIC эффективна при разделении двух подклассов РЕ, что позволяет легко идентифицировать и относительный количественный анализ. Спектры ЖХ-МС / МС использовали для определения молекулярного видового состава как монометилированного, так и диацил-PE подклассов (таблица 1).

    Рисунок 3

    ( a ) Хроматограмма HILIC-MS сложных липидов, экстрагированных из почвенных микробов в режиме отрицательных ионов. ( b) Хроматограмма экстрагированных ионов (XIC) m / z 700.49 и ( c d ) HILIC-HRMS / MS спектры m / z 700,49, элюированные через 12,40 мин и 17,61 мин, представляющие MMPE 16: 1/16: 1 и PE 16: 1/17: 1 молекулярные виды соответственно.

    Таблица 1 Относительное количественное определение молекулярных форм MMPE и PE, присутствующих в почвенных микробах, определенное с помощью хроматограмм HILIC-MS в режиме отрицательных ионов.

    Например, два изомера с m / z m / z 700,49 были четко разделены после хроматографии HILIC (рис. 3b). Присваивания производились следующим образом: m / z 140.01 и 154.03 фрагментные ионы использовали для различения головных групп PE и MMPE. Для липидов PE известно, что пути, ведущие к образованию карбоксилат-аниона и ионов, соответствующих потере кетена, стерически более благоприятны в положении sn- 2 при низкоэнергетическом CID 37,40 . Модифицированный липид монометил-ПЭ в почвенных микробах был идентифицирован как MMPE 16: 1/16: 1, который продуцировал только один карбоксилат-анион m / z 253,22 из жирной кислоты C16: 1 (рис.3в). Потеря кетена sn -2 C16: 1 с образованием иона m / z 464,28 (фиг. 3c) такая же, как и минорный ион, наблюдаемый на фиг. 3d.

    Карбоксилат-анионы наблюдались при m / z 253,22 (C16: 1) и m / z 267,23 (C17: 1) из PE 33: 2, что дает молекулярный видовой состав PE 16: 1–17: 1 (рис. 3г). Более высокое содержание m / z C17: 1 карбоксилат-аниона вместе с основным ионом лизоформного фрагмента наблюдается при m / z 450,26 (потеря кетена C17: 1 sn -2, как показано на рис.3d) указал PE 16: 1/17: 1 как доминирующий изомер. Также минорный ион наблюдается при m / z 464,28 на фиг. 3d, что представляет собой присутствие в образце молекулярных частиц PE 17: 1/16: 1 (таблица 2).

    Таблица 2 Относительный состав основных молекулярных форм (ацил) фосфатидилглицерина, присутствующих в корнях силосной кукурузы после выращивания в прохладных климатических условиях.

    Отнесения основных диацил- и метилированных изомеров ПЭ, обнаруженных в почвенных микробах, перечислены в таблице 1 вместе с их временем удерживания.Подсчет площади извлеченных участков использовался для относительного количественного определения (таблица 1). Таким образом, MMPE составлял 18,73% от общего состава класса липидов PE, наблюдаемого у почвенных микробов, живущих в прохладных климатических условиях в подзолистых почвах. Эти результаты демонстрируют потенциальные возможности применения усовершенствованного метода HILIC для включения метилированного PE (модифицированного PE) во время рутинного липидомического анализа сложных биологических образцов.

    Применение HILIC и C30-RPLC для обнаружения ацилПГ в образцах корня кукурузы на силос

    Состав мембранных липидов в корнях представляет интерес для изучения реакции растений на стресс в различных климатических условиях и режимах управления посевами 41 .HILIC-хроматография была применена для оценки липидного класса мембран корней кукурузы на силос при культивировании в прохладных климатических условиях (рис. 4а). В сложной липидной смеси, полученной из корней силоса кукурузы, были обнаружены три категории липидов, включая фитосфинголипиды (phytoSP), гликолипиды и фосфолипиды (8 классов). Было обнаружено, что классы полярных липидов мембраны корней кукурузы состоят из PG, PC, PE, LPC, PI, LPE, PA и LPA, в которых внутриклассовое разделение отдельных молекулярных видов может быть частично разрешено после анализа HILIC-HRMS / MS (см. Инжир.S1).

    Рис. 4 Хроматограммы сложных липидов

    ( a ) HILIC и ( b ) C30RPLC-MS комплексных липидов, наблюдаемых в корнях кукурузы на силос в режиме отрицательных ионов. МС / МС спектры PG 34: 2, идентифицированного как ион ( c ) [MH] при m / z 745,50 или ( e ) [M + Na-2H] ион при мкм / z 767,53 и ацилPG 50: 2, идентифицированный как ( d ) [MH] ион при m / z 983,73 или ( f ) [M + Na-2H] ион при m / z 1005.75. Примеры структуры и фрагментации PG и acylPG вставлены в каждый спектр МС / МС.

    Используя этот подход, мы наблюдаем присутствие модифицированных PG в корнях кукурузы. Известно, что липиды PG имеют важную корреляцию с чувствительностью растений к температуре холода 13 . Модифицированный PG был идентифицирован как ацилфосфатидилглицерин (acylPG) после анализа HRMS / MS (фиг. 4). И модифицированный (ацилPG), и немодифицированный PG наблюдались в корнях силосной кукурузы как натриевые [M + Na-2H] и депротонированные ([MH] ) аддукты (Таблица 2, Рисунки 4 и 5. ).Важно отметить, что в систему растворителей не добавляли натриевый буфер. Известно, что корни имеют высокий уровень натрия в результате поглощения почвой и, по-видимому, являются источником эндогенного натрия, который образовывал аддукты с PG 42 . Ацилированная модификация произошла в глицериновой головной группе PG и была обнаружена в парах с неацилированной формой PG. Модифицированная головная группа привела к тому, что ацилPG был менее полярным, чем PG, и, как таковой, элюировался перед PG во время HILIC-хроматографии. Таким образом, наблюдалось элюирование ацилPG при 8.53 мин непосредственно перед элюированием пика PG через 10,67 мин во время HILIC-хроматографии (рис. 4a). Подтверждение идентичности acylPG было сделано на основе паттернов фрагментации HRMS / MS (фиг. 4e, f). Головная группа PG была идентифицирована по ее депротонированным ионам-предшественникам [M-H] (рис. 4c, d) или ионам натриевого аддукта (рис. 4e, f). Определение положений жирных ацильных цепей на глицериновой основной цепи было основано на относительном количестве карбоксилат-анионов и потерях кетена, возникающих из sn -1, sn -2 и sn -3 ‘положений ( sn -3 ‘Представляет собой ацилированное положение в головной группе фосфоглицерина).Масс-спектральная интерпретация согласуется с ранее описанной фрагментацией ацилPG 12 . Из общего силоса корня кукурузы PG и ацилPG масс-спектральной интенсивности; 25,22% приходилось на ацилПГ (таблица 2).

    Фигура 5

    Экстрагированная ионная хроматограмма (XIC) ацилPG в корнях кукурузы, полученных из ( a ) HILIC и ( b ) C30-RPLC, ( c ) HILIC-MS всего ацилPG. Соответствующий спектр МСВР / МС m / z 1029,76, полученный из ( d ) HILIC и ( e , f ) C30-RPLC.Структуры acylPG вставлены в спектры МС / МС.

    МС / МС спектр ацилPG 50: 2 при m / z 983,73 ([MH] ) на рис. 4d показывает наиболее заметную потерю C18: 2-кетена при m / z 721,50, которая является диагностическим признаком жирной ацильной цепи в положении sn -2 глицеринового остова. Кроме того, m / z 255 и m / z 279 ионов являются диагностическими для жирных ацильных цепей C16: 0 и C18: 2, что указывает на то, что только два типа жирных кислот присутствуют в этом молекулярном виде ацилPG.Поскольку C18: 2 жирная кислота уже была идентифицирована в положении sn -2 глицериновой части, она оставляет обе жирные ацильные цепи C16: 0 в sn- 1 и sn- 3 ‘. Это согласуется с Hsu et al . исследование 12 , в котором сообщается, что относительная степень потери жирных кислот при sn -1 или sn -3 ′ выше, чем потеря кетена (т.е. m / z 727,49 на рис. 4d, что соответствует C16 : 0 потеря кислоты). Интересно, что то же соединение, что и натриевый аддукт [M + Na-2H] , дает более заметный ион-фрагмент ( m / z 749.52 на фиг. 4f) для потери C16: 0 жирной кислоты, чем, например, потери кетена, и была обозначена как sn- 3′-жирная кислота. Таким образом, ацилPG 50: 2 в мембране корня кукурузы был обозначен как ацилPG 16: 0/18: 2- (16: 0) в обоих аддуктах [M-H] и [M + Na-2H] . Это также изменяет порядок карбоксилат-анионов, который описывается как sn- 2> sn- 3 ′ ≫ sn- 1 с [MH] на гораздо более высокое относительное содержание sn- 3 ′ ≫ sn- 2> sn- 1 жирные ацильные анионы ( e . g ., m / z 255 и m / z 279 на рис. 4e, f). Как обсуждалось ранее, положение жирных ацильных цепей в PG из корней кукурузы может иметь значение с точки зрения указания пути их биосинтеза, и, таким образом, идентификация их позиционных изомеров является целевой с помощью хроматографии.

    Анализ acylPG с использованием подходов HILIC и C30RP на рис. 5 продемонстрировал полезность использования C30RP, комплементарного HILIC, для разделения изомеров ацилPG. HILIC приводил к тому, что все молекулярные частицы ацилPG элюировались в виде одного пика и были разделены на отдельные молекулярные частицы после разделения с использованием тандемной масс-спектрометрии высокого разрешения (рис.5а, в). С другой стороны, молекулярные виды были разделены на основе длины цепи и ненасыщенности с использованием C30-RPLC (рис. 5b). Например, по данным HILIC-HRMS / MS на фиг. 5d наблюдалось, что ацилPG 52: 4 в корне кукурузы существует в виде двух изомеров ацилPG 16: 0/18: 2- (18: 2) и 18: 2/18: 2. — (16: 0). Присутствие обоих изомеров было отнесено к потерям sn- 3 ‘C16: 0 и C18: 2 жирных кислот, представленных почти одинаковым содержанием m / z , 773,52 и 749,52, соответственно (фиг. 5d). Оба изомера ацилPG 52: 4 также наблюдались после C30-RPLC и присутствовали в начале и в конце пика, элюируемого на 24.51 мин (рис. 5b) и их соответствующие спектры C30RPLC-MS / MS, дополнительно подтверждающие результаты, полученные с использованием HILIC. Основные различия между фрагментацией двух позиционных изомеров ацилPG видны на рис. 5 (e, f), включая противоположную относительную распространенность m / z 255,23 (C16: 0) и 279,23 (C18: 2) вместе с характеристикой потеря sn- 3′-жирной кислоты, i . e ., m / z 773,52 из acylPG 18: 2/18: 2- (16: 0) и m / z 749,52 из acylPG 16: 0/18: 2- (18: 2).Для последнего C18: 2 был назначен в позиции sn- 2 из-за относительной численности m / z 255 и 279, и это согласуется с присвоением из фрагментации [MH] (см. Рис. S2 и S3. ).

    Этот результат демонстрирует применение комбинированных LC-платформ для обнаружения нового липида в корне силосной кукурузы во время рутинной липидомики. Мы также наблюдали, что использование HILIC, комплементарного C30 обращенно-фазовой хроматографии, помогло идентифицировать эту модифицированную головную группу PG в корнях кукурузы, в то время как C30RP смог подтвердить идентичность модифицированных липидов с дальнейшим внутриклассовым разделением молекулярных видов ацилPG.Ацилированный фосфатидилглицерин (acylPG) редко встречается в растениях, за некоторыми исключениями, описанными в овсе ( Avena sativa ) 43 и Arabidopsis листья 44 в качестве потенциальной реакции на климатические условия. Возникновение ацилПГ, наблюдаемое в корнях кукурузы, вполне может быть связано с условиями выращивания в прохладных климатических условиях Ньюфаундленда.

    Применение HILIC-хроматографии для анализа региоизомеров лизофосфолипидов в образцах листьев капусты

    Мы также исследовали HILIC-хроматографию для разделения региоизомеров лизофосфолипидов во время рутинного анализа липидома капусты после культивирования в различных природных средах.После хроматографии HILIC не только липиды капусты LPA, LPE и LPC были четко отделены друг от друга, но и региоизомеры (различаются в зависимости от положения жирной кислоты в положениях sn- 1 или sn- 2 на глицериновый остов) в каждом классе лизофосфолипидов. Было обнаружено, что региоизомеры sn -1 имеют более длительное время удерживания и более высокую относительную численность по сравнению с изомерами sn -2, что согласуется с предыдущими выводами 45 .HILIC-HRMS / MS-спектры изомерных ионных пар показаны на фиг.6, что указывает на более высокое относительное содержание ионов жирных кислот, образованных в результате расщепления жирной ацильной цепи в положении sn -2, по сравнению с ионами, образованными в sn Положение -1 позволяет дифференцировать (лизо) фосфолипидные региоизомеры.

    Рисунок 6

    Экстракционная ионная хроматография (XIC) и спектры HRMS / MS ( a ) sn- LPC 18: 3 региоизомеров при m / z 576.33 ( b ) sn- LPE 18: 3 региоизомера при m / z 474,26 и ( c ) sn- LPA 18: 3 региоизомера при m / z 431,22 наблюдались в листьях капусты.

    Разделение классов лизофосфолипидов и их региоизомеров с помощью HILIC-хроматографии позволило однозначно идентифицировать и относительное количество каждого отдельного вида, присутствующего в образце. Относительное количественное определение каждого региоизомера было основано на площади пика, полученной из хроматограмм экстрагированных ионов (XIC), вместе с назначенным временем удерживания.Региоизомер sn -1 лизофосфолипидов (1-LPE и 1-LPC) в листьях капусты наблюдался на значительно более высоком уровне по сравнению с их аналогами sn -2 (фиг. 6 и таблица S-2). Хотя о применении HILIC-хроматографии для разделения региоизомеров лизофосфолипидов сообщалось ранее, эта информация впервые представлена ​​для региоизомеров лизофосфолипидов капусты. Основная цель этого раздела — продемонстрировать применимость расширенного подхода HILIC для облегчения анализа региоизомеров, присутствующих в лизофосфолипидах, а также анализа модифицированных фосфолипидов во время рутинной липидомики.

    C30-RPLC-HRMS / MS для разделения и идентификации нейтральных липидов в качестве дополнительной платформы к HILIC-HRMS / MS

    Одним из ограничений HILIC-хроматографии является плохое удерживание нейтральных (неполярных) липидов, таких как моно / ди / триацилглицерины, холестерин, свободные жирные кислоты и т. д. Эти нейтральные липиды имеют тенденцию ко-элюироваться очень рано близко к фронту растворителя (-1, и ., пик объема пустот) во время HILIC. Таким образом, C30-RPLC был выбран для анализа нейтральных липидов в качестве дополнительного подхода к HILIC.C30-RPLC сравнивали с другими хроматографическими методами с обращенной фазой (C8 и C18), и было продемонстрировано, что он очень эффективен при разделении нейтральных липидов, особенно триацилглицеринов, с высокой селективностью и геометрической формой пиков 24,25,28 . Кроме того, комбинация C30RP с точной масс-спектрометрией высокого разрешения предлагает превосходные возможности для разделения нейтральных изобар липидов и изомеров, присутствующих в биологических образцах. Мы применили подход C30-RPLC для разделения нейтральных липидов, присутствующих в нашей стандартной смеси, с использованием режима положительных ионов, как показано на рис.7.

    Рисунок 7

    Хроматограмма C30-RPLC-MS, показывающая разделение нейтральных липидов в режиме положительных ионов. ( a ) представляет молекулярные частицы TG, разделенные на основе длины цепи, ( b ) разделение молекул DG, церамидов и гликолипидов. C30-RPLC-MS / MS спектры ионов [M + NH 4 ] + , представляющих стандарты липидов: ( c ) TG 8: 0/8: 0/8: 0, ( d ) TG 12 : 0/12: 0/12: 0, ( e ) TG 14: 0/14: 0/14: 0, ( f ) TG 16: 0/16: 0/16: 0, ( г ) MGDG 16: 3/18: 3, ( h ) Cer d18: 1/18: 0 [M + H] + ion, ( i ) DG 18: 0/20: 4 и ( j ) ДГ О-20: 0 / О-20: 0.

    Молекулярные соединения триглицеридов (TG) в стандартной смеси четко разделялись друг с другом на основании состава жирных кислот и длины цепи в диапазоне от TG 24: 0 до TG 48: 0 (фиг. 7a). Молекулярные частицы TG наблюдались как аддукты NH 4 + (рис. 7e, f). Например, нейтральная потеря 161 Да на рис. 7c представляет потерю жирных кислот C8: 0 из m / z 488,40 [TG 8: 0/8: 0/8: 0 + NH 4 ] + ion, а m / z 551.Ион 51 на рис. 7е соответствует потере нейтрали FA 16: 0 из TG 16: 0/16: 0/16: 0. Фрагментные ионы, видимые при m / z 239,24, m / z 313,27 и m / z 551,51 на рис. 7f, были отнесены к ионам кетена [FA 16: 0 + H – H 2 O] + , [MG 16: 0 + H – H 2 O] + и [DG 32: 0 + H – H 2 O] + , соответственно. Используя типичные ионы продуктов, наблюдаемые в режиме положительных ионов для TG, были выяснены полные профили FA каждого молекулярного вида TG в соответствии с правилами, наблюдаемыми для фрагментации TG 46,47 .Также наблюдали, что диглицериды (DG) четко отделяются друг от друга после C30-RPLC-MS / MS независимо от связей, присутствующих в структуре. Как простые эфирные (O-DG), так и связанные сложноэфирно-связанные молекулы DG были включены в стандартную смесь липидов и наблюдались как [O-DG + NH 4 ] + и [DG + NH 4 ] + при m / z 670,71 и m / z 662,57 соответственно (рис. 7i, j). Потеря воды [H 2 O + NH 3 ] ( i . e ., -35 Да) и образование ионов фрагмента MG характерны для идентификации DG. Например, [MG 18: 0 + H – H 2 O] + при m / z 341,31 и [MG 20: 4 + H – H 2 O] + при m / z. 361,27 были образованы из DG 18: 0/20: 4 [M + NH 4 ] + , присутствующего в стандартной смеси липидов. Изменение связи сложного эфира с эфиром в O-DG привело к потере спирта ( m / z 373,37) вместо нейтральной жирной кислоты и является диагностическим признаком молекулярных форм DG, связанных с эфиром (рис.7j). Гликолипиды также четко отделялись от TG, DG и церамидов после анализа C30-RPLC-MS / MS (рис. 7a-j). Молекулярные соединения MGDG элюируются между 16,95 и 18,01 минутами, затем Cer d36: 1 через 21,18 минуты, DG 38: 4 через 21,76 минуты, Cer d42: 2 через 21,61 минуту и ​​O-DG через 24,70 минуты (фиг. 7b). ТГ были вкраплены между этими молекулярными видами и четко разделялись до или после этих видов и классов в зависимости от длины цепи (рис.7а, б).

    Применяя этот подход к образцам головного мозга крыс (рис. 8), мы продемонстрировали, что C30-RPLC-MS / MS эффективен при разделении нейтральных липидов мозга, что согласуется с предыдущими сообщениями в литературе с использованием этой (C30) и другой обратной фазы (C8). или C18) столбцы 24,48 . Триглицериды головного мозга крысы представлены в качестве примера метода C30-RPLC для анализа нейтральных липидов в биологических образцах. Высокое разрешение изомеров ТГ головного мозга крысы было достигнуто с помощью разделения C30-RP (рис.8б – д). Например, хроматограмма экстрагированных ионов, показанная на рис. 8b для m / z 896,77, наблюдаемых в ТГ головного мозга крысы, дала три четко разделенных пика, элюированных через 25,10, 25,60 и 26,21 мин (фиг. 8b), соответствующих трем изомерам (фиг. 8c). –E) из [TG 54: 6 + NH 4 ] + . Как выяснение из стандартной смеси нейтральных липидов; состав и положение жирных ацильных цепей в каждой молекуле TG можно определить по ( i ) нейтральной потере FA (в виде аддуктов аммония), ( ii ) образованию иона MG (в форме [MG + H – H 2 O] + ионы продукта) и ( iii ) FA кетен-ион ( i . e ., [FA + H – H 2 O] + ) 46 . Используя это в качестве руководства, три изомера [TG 54: 6 + NH 4 ] + были отнесены к TG 18: 2/18: 2/18: 2, TG 16: 0/20: 4/18: 2 и TG 16: 0/22: 6/16: 0 молекулярных частиц (рис. 8c – e). Цель этого раздела — продемонстрировать, что использование C30-RPLC-HRMS / MS в качестве дополнительного метода к HILIC-HRMS / MS является подходящим подходом для анализа нейтральных липидов, модифицированных липидов, а также региоизомеров (. е ., sn -позиционные изомеры) липидов во время рутинной липидомики широкого диапазона биологических образцов (микробов, растений и животных).

    Фигура 8

    ( a ) C30-RPLC-HESI-MS хроматограмма липидов головного мозга крысы, проанализированных в режиме положительных ионов. ( b ) Экстрагированная ионная хроматограмма (XIC), показывающая разделение TG 54: 6 изомеров в мозге крысы, ( c e ) C30-RPLC-HRMS / MS спектры m / z 896,77 [M + NH 4 ] + ион-предшественник, представляющий три изомера ( c ) TG 18: 2/18: 2/18: 2, ( d ) TG 16: 0/20: 4/18: 2 и ( d ) TG 16: 0/22: 6/16: 0 с элюированием при 25.10, 25,60 и 26,21 минуты соответственно.

    Методика формирования компетенций по укреплению здоровья у будущих полицейских с помощью личностно-ориентированного подхода к физическому воспитанию | Копотун

    Баев О.А. (2014). Изучение адаптивного потенциала студенческой молодежи. Проблемы экологической и медицинской генетики и клинической иммунологии, 1, 283-289.

    Белланка Дж. И Брандт Р. (2010). Навыки 21 века: переосмысление того, как учатся студенты. Блумингтон, Индиана: Дерево решений.

    Баучер Б., Робертсон Э., Уэйннер Р. и Сандерс Б. (2013). «Переворот» Техас государственного университета физической учебный план терапевт опорно-двигательного аппарата: Внедрение гибридной модели обучения. Журнал физиотерапевтического образования, 27 (3), 72-77.

    Доус, Дж., Орр, Р. М., Кок, К. (2016). Использование двух программ физической подготовки и фитнес-характеристик курсантов полицейской академии. Журнал спортивной подготовки, 51, 887-896.

    ДеНисшен, К.А., Кардина, К., Соболь, Дж. Дж., Циммерман, Б., и Гавронский, А. (2018). Тренировки по здоровью, благополучию и фитнесу: пилотное исследование по подготовке физически здоровых выпускников, готовых к полицейской академии. Международный журнал полицейской науки и управления, 20 (1), 66-79. https://doi.org/10.1177/1461355718756412

    Дичева Д., Дичев К., Агре Г. и Ангелова Г. (2015). Геймификация в образовании: систематическое картографическое исследование. Образовательные технологии и общество, 18 (3), 1-14.

    Димитриевич, Р., Коропановский, Н., Допсай, М., Вукович, Г., и Янкович, Р. (2014). Влияние различных программ физического воспитания на физические способности студентов-полицейских. Полицейская деятельность: Международный журнал полицейских стратегий и управления, 37 (4), 794-808. https://doi.org/10.1108/PIJPSM-05-2014-0060

    Добре, О.-И. (2013). Мотивация сотрудников и организационная эффективность. Обзор прикладных социально-экономических исследований, 5 (1), 49-53.

    Финдли-Томпсон, С., Момбуркетт, П.(2014). Оценка перевернутого класса в бакалавриате по бизнес-курсу. Бизнес-образование и аккредитация, 6 (1), 63-71.

    Гринберг, М. (2015). Это не игра: темная сторона геймификации. Получено с https://newtonew.com/discussions/gamification-dark-side

    .

    Кокун, О. М., Пишко, И. О., Лозинская, Н. С., Копаница, О. В., Малхазов, О. Р. (2011). Сборник методик диагностики психологической готовности военнослужащих по контракту к деятельности в миротворческих частях: методическое пособие.Киев, Украина: НИЦ ВП Вооруженных сил.

    Лагестад, П., и Ван ден Тиллаар, Р. (2014). Сравнение подготовки и физических показателей студентов-полицейских в начале и в конце трехлетнего обучения в полиции. Журнал исследований силы и кондиционирования, 28 (5), 1394-1400. https://doi.org/10.1519/JSC.0000000000000273

    Махони Д. и Пренцлер Т. (1996). Полицейское обучение, университет и полицейская служба. Австралийское исследование. Журнал образования в области уголовного правосудия, 7 (2), 283-304.

    Марчевский А. (2013). В чем разница между геймификацией и серьезными играми? Получено с http://www.gamasutra.com/blogs/AndrzejMarczewski/20130311/188218/Whats_the_difference_between_Gamification_and_Serious_Games.php

    Мурзина О.А. (2014). Формирование профессиональных ценностных ориентаций будущих сотрудников правоохранительных органов: методические рекомендации. Запорожье, Украина: ЗГМУ.

    Набил И., Бейкер Б. А., МакГрейл М. П. и Флоттермеш Т.Дж. (2007). Корреляция между физической активностью, фитнес и опорно-двигательного аппарата травм в полицейских. Миннесота Медицина, 90 (9), 40-43.

    О’Донован, С., Гейн, Дж., И Марэ, П. (2013). Пример геймификации курса разработки игр университетского уровня. Конференция Южноафриканского института компьютерных ученых и информационных технологов (стр. 245–251). Восточный Лондон, Южная Африка. https://doi.org/10.1145/2513456.2513469

    Плотников, Р.К., Костиган, С. А., Уильямс, Р. Л., Хатчессон, М. Дж., Кеннеди, С. Г., Робардс, С. Л. и др. (2015). Эффективность вмешательств, направленных на физическую активность, питание и здоровый вес для студентов университетов и колледжей: систематический обзор и метаанализ. Международный журнал поведенческого питания и физической активности, 12 (1), 45. https://doi.org/10.1186/s12966-015-0203-7.

    Психология счастливой жизни. (2008). Методы диагностики личностной ориентации Б.Бас (Опросник Смекало-Кучера). Получено с https://psycabi.net/testy/233-methodics-diagnostics-direction-lichnosti-b-bassa-prosnik-smekala-kuchera

    .

    Ротман, А., Бартельс, Р., Влашин, Дж., И Саловей, П. (2006). Стратегическое использование сообщений о прибылях и убытках для пропаганды здорового поведения: как теория может информировать практику. Журнал коммуникаций, 56, 202-220. https://doi.org/10.1111/j.1460-2466.2006.00290.x.

    Семиченко В. А. (2004). Проблемы мотивации поведения и деятельности человека.Модульный курс психологии. Киев, Украина: Миллениум.

    Саймонс-Мортон, Б.Г., Маклерой, К.Р., и Вендель, М.Л. (2011). Теория поведения в практике и исследованиях укрепления здоровья. Бостон, Массачусетс: Jones & Bartlett Learning.

    Текстовый анализатор. (н / д). Получено с http://textalyser.net/

    Ваш психолог. (н / д). Мотивация профессиональной деятельности (метод К. Замфира в модификации А. Реана). Получено с http://www.vashpsixolog.ru/psychodiagnostic-school-psychologist/122-tests-guidance/716-motivation-professional-activity-c-zamfir-technique-to-modify-a-a-reana

    .

    Хирургия, гастроэнтерология и онкология

    Прочитать статью Цель: Выявление клинико-биологических характеристик рака груди у женщин с болезнью Педжета (MPD) молочной железы.

    Методы: Мы провели ретроспективный анализ 36 женщин с первичным диагнозом болезни Педжета, пациенты проходили лечение в маммологическом отделении Сан-Орсола-Мальпиги в Италии в период с 2000 по 2016 год. Демографические данные пациентов, клинические данные, рентгенологические и патологические отчеты были извлечены из электронных медицинских карт.

    Результат: Было задействовано 36 пациентов с диагнозом MPD. Средний возраст составил 64,28 года …. [подробнее]

    Прочитать статью Предпосылки: Недавняя работа определила время, необходимое для удаления донорской печени во время извлечения органа (время извлечения), как ранее нераспознанную переменную, влияющую на результат трансплантации.Мы оценили влияние времени экстракции на раннюю функцию трансплантата в нашей собственной практике в загруженном центре печени. Пациенты и

    Методы: было обследовано 218 реципиентов трансплантатов печени, пересаженных в нашем центре (Addenbrooke’s, Кембридж) в период с октября 2014 года по октябрь 2017 года. Ранняя функция трансплантата оценивалась с помощью модели для оценки функции раннего аллотрансплантата (MEAF) как в одномерном, так и в m …. [подробнее]

    Прочитать статью Предпосылки: Было показано, что протокол ускоренного восстановления после операции (ERAS) сокращает период восстановления и послеоперационные осложнения.Это проспективное исследование было направлено на оценку краткосрочных результатов ERAS у пациентов, перенесших операцию на верхних отделах желудочно-кишечного тракта (UGI).

    Методы: Были включены пациенты, перенесшие операции по поводу доброкачественных или злокачественных заболеваний пищевода, пищеводно-желудочного перехода или желудка в период с октября 2018 г. по декабрь 2019 г. Результаты, сравниваемые между ERAS и традиционной помощью (CC), включали продолжительность пребывания в больнице (LOS), послеоперационные осложнения …. [подробнее]

    Прочитать статью Введение: Желудочно-кишечная стромальная опухоль (GIST) является наиболее распространенной мезенхимальной опухолью кишечника.Однако эпидемиология болезни в Египте изучена недостаточно.

    Методы: Ретроспективное когортное исследование было проведено на пациентах, лечившихся от GIST с июня 2008 года по апрель 2018 года в специализированном центре. Шестьдесят два случая подходили для исследования.

  • Добавить комментарий